八种抗生素检测结题报告.docVIP

院级本科生科技创新基金项目 研 究 报 告 项 目 名 称 畜、禽肉中八种抗生素的测定 立 项 时 间 2011年3月 计划完成时间 2012年3月 项目负责人 邓明镜 学院与班级 化生学院 生技0901班 2012年 4 月 22 日 北京科技大学 教务处 摘 要 抗生素是由微生物或高等动植物在生活过程中所产生的具有抗病原体或其它活性的一类次级代谢产物，主要用于治疗各种细菌感染或其以致病微生物感染，广泛应用于医药卫生领域中。有人估计，由于抗生素的发明，全人类的平均寿命增加了10岁。但是，抗生素的广泛使用，也带来了一些严重问题。例如，若过量的注射或在饲料中添加抗生素，将致使病菌耐药能力逐年增强，从而减少畜、禽对病菌的抵抗力；而人体经常摄入低剂量的抗生素残留物，会逐渐在体内蓄积而导致各种器官病变。所以抗生素残留已经成为乳肉类食品安全中一个日益严峻的问题。 本实验采用高效液相色谱法（HPLC），在中华人民共和国国家标准方法（GB/T 5009.116-2003）的基础上进行优化，旨在建立一种能够同时检测畜禽肉中土霉素（OTC）、金霉素（CTC）、四环素（TC）、氯霉素（CLP）、磺胺、磺胺二甲嘧啶（SM2）、磺胺甲恶唑（SMZ）和氟哌酸（FPA）八种抗生素的方法。实验时色谱条件为：色谱柱规格ODS-C18（5μm）6.2mm×15cm，检测波长355nm和280nm，柱温40℃，流速0.8mL/min，进样量20μL，流动相为乙腈：0.01mol/L磷酸二氢钠（用30%硝酸溶液调节PH2.5）=23:77。 本方法对八种抗生素的分离效果较好，实现了基线分离。实验中分别研究并确定了八种抗生素的检出限（LOD）、定量限（LOQ）和线性范围；而在实际肉样的测定中，由于磺胺的出峰时间与鸡肉杂质峰相重合，所以我们比较三种C18固相萃取小柱对干扰物的去除效果，实验结果表明杂质的去除效果均不明显，无法测算其标准曲线，而其他七种抗生素测定效果理想。本方法的建立更快捷的实现了肉类中多种抗生素残留的检测；不仅节约了实验室检测的成本，缩短了检测时间，还大大提高了检测精度。 [关键词] 抗生素 高效液相色谱 畜禽肉 目　　录 TOC \o 1-3 \h \z HYPERLINK \l _Toc294404793 摘　　要 1 HYPERLINK \l _Toc294404795 1 绪论 3 1.1 项目背景条件 3 1.2 项目意义 3 1.3 主要工作 3 HYPERLINK \l _Toc294404796 2文献综述 4 HYPERLINK \l _Toc294404797 2.1抗生素概述 PAGEREF _Toc294404797 \h 4 HYPERLINK \l _Toc294404798 2.1.1抗生素定义 4 HYPERLINK \l _Toc294404799 2.1.2抗生素种类 4 HYPERLINK \l _Toc294404800 2.1.3四类抗生素简介 5 2.2 抗生素残留现状 5 2.3 抗生素残留检测方法 6 HYPERLINK \l _Toc294404801 2.4 高效液相色谱法 7 HYPERLINK \l _Toc294404802 2.4.1高效液相色谱法原理 7 HYPERLINK \l _Toc294404803 2.4.2高效液相色谱法特点 7 HYPERLINK \l _Toc294404804 2.4.3 ODS柱和固相萃取小柱 7 HYPERLINK \l _Toc294404805 2.5 检出限（LOD）和定量限（LOQ） 8 HYPERLINK \l _Toc294404808 3畜禽肉中八种抗生素的检测 9 HYPERLINK \l _Toc294404809 3.1实验材料及仪器 9 HYPERLINK \l _Toc294404810 3.1.1材料 9 HYPERLINK \l _Toc294404811 3.1.2仪器 9 HYPERLINK \l _Toc294404812 3.2实验方法 9 HYPERLINK \l _Toc294404813 3.2.1猪肉中土霉素、四环素、金霉素残留量的测定 9 HYPERLINK \l _Toc294404814 3.2.2猪肉中氯霉素残留量的测定 10 HYPERLINK \l _Toc294404815 3.2.3条件优化，鸡肉中四环素残留的测定 11 HYPERLINK \l _Toc294404816 3.2.4八种抗生素检出限（