微生物检测领域新技术介绍.pptVIP

物理参数间接测定微生物(电导率、二氧化碳、颜色) 优点：菌数越高，越快出结果.电导率方法成本较低 缺点：需要做标准曲线；要让菌数长到上百万个才有明显的信号变化；基于二氧化碳和颜色变化的方法检测成本太高；受样品基质干扰较大；微生物区系复杂偏差较大。 优点： 直接对单个细胞进行计数，无需长成菌落；检测时间只需1小时； 灵敏度可以达到1-100个菌 有全自动或半自动仪器可选 缺点： 仪器投入较大；检测成本相对较高。 Fluorassure? Reagents 荧光标记试剂 ChemScan ? RDI 细胞扫描读数 用于可过滤产品 D-Count? 全自动流式细胞 用于可过滤或不可过滤产品 BactiFlow? 紧凑型流式细胞仪 用于可过滤或不可过滤产品 基于单个完整细胞的荧光标记技术 可对总活菌数及特定微生物 十几年工业应用经验 大量的科学文献支持 酶 活性底物 游离荧光色原 细菌 活细胞的标准: 酶活力 膜完整性 用于: TVC总活菌数 酵母和霉菌总数 细菌 酵母 霉菌 流式细胞技术在微生物检测中的应用 用于可过滤或不可过滤产品的微生物 快速计数 灵敏度可以达到1-100个细胞 30-60min完成检测 单细胞标记检测技术 流式细胞: 线性流体 单细胞分析 高灵敏检测器 红光检测器 与鞘液混合后的废液 绿光检测器 标记后的样品 激光 鞘液 鞘液流速：10mL/min 样品流速：200uL/min 前处理后的样品放入自动仪器中 每批25或50个样品 自动化仪器，减少人工操作 全自动标记和过滤 自动加所有试剂 自动控制保温温度和时间 快速灵敏的分析 每小时50个样品 结果直接显示每mL多少个菌数 饮料 果汁及浓缩汁 原奶、UHT奶、巴氏奶 软饮料 食品 酸奶 水果制品 甜品 蔬菜制品 肉类 部分调味品 全球重要客户名单 Antartic, Unilever Best Food, Campbell, Coca-Cola, Danone, Délifruits, Eckes Granini, Gerber, IFF, Institut Pasteur, Joker, Moet et Chandon, Migro, Mona, Müller, Nestlé, Onken, Sill, Swiss Dairy Food, Yoplait, Zott, Zuegg,… BDF, L’Oréal, PG, Roval, Yves Rocher, Yves Saint Laurent, … ChemScanòRDI 用于可过滤产品的微生物或原生虫 快速计数 灵敏度可以达到1个细胞 100min完成检测 2. 标记 3. 激光扫描3min 1. 过滤 1. 过滤 2. 标记 3. 激光扫描 样品过滤 滤膜垫板含饱和预标记液 主要目的是激活细胞内酶 活力，增加膜通透性 预标记60 min 滤膜转移 ChemScanRDI ? 激光扫描 滤膜垫板含饱和预标记液 主要目的是对细胞进行荧 光标记 标记30 min 对滤膜进行全场扫描 3 分钟扫描时间 结果直接显示细胞个数 饮用水总活菌数、贾第鞭毛虫和隐孢子虫 可过滤澄清样品中的TVC检测 制药企业过程用水中总活菌数(生物负载量) 半导体企业生产用水中总菌数 航空燃油领域用于总菌数检测 GSK 在2004年获 FDA认可 FDA 认可使用ChemScan RDI用于水中常规微生物分析 Sanofi Winthrop 获西班牙权威认证 用于非灭菌产品。 several sites in Europe have been audited by FDA and demonstrated the use of the ChemScan. None of the inspectors had any adverse comments on the systems. JOHNSON JOHNSON (M) MERCK (M) BAUSCH Lomb ALCON LONZA WYETH NOVARTIS (M) ASTRA ZENECA PARKE DAVIS PFIZER INSTITUT PASTEUR AVENTIS ROCHE (M) SANOFI (M) SMITH NEPHEW GLAXO SMITH KLINE (M) SERONO DAIICHI TORII FUJISAWA CHUGAI …… - USA - USA - USA - USA - USA - EUROPE - EUROPE - EUROPE - EUROPE - EUROPE