淋球菌核酸检测试剂盒质量评价.docVIP

淋球菌核酸检测试剂盒质量评价 　　[摘要] 目的 对12种淋球菌核酸检测试剂盒进行质量评价。 方法 应用12种淋球菌PCR试剂盒质控参考品，按照各试剂盒说明书的方法提取模板及核酸扩增，检测各试剂盒的阳性参考品符合率、阴性参考品符合率、批内精密度及最低检测限，并进行比较分析。 结果 12种试剂盒的阳性参考品符合率及阴性参考品符合率均为100%；批内精密度：各试剂盒检测结果Ct值的变异系数均小于5.0%；12种试剂盒中有10种试剂盒的最低检出限能达到1×103个菌/mL，其中3种能达到1×102个菌/mL，但另外2种试剂盒的最低检出限仅达到1×104个菌/mL。 结论 12种淋球菌核酸检测试剂盒质量均较好，性能可靠。 　　[关键词] 淋球菌；试剂盒；国家参考品；实时PCR 　　[中图分类号] R515 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2016）08（c）-0008-04 　　[Abstract] Objective To evaluate twelve PCR kits for detection of Neisseria gonorrhea.Methods Twelve kinds of Neisseria gonorrhoeae PCR kit were selected， the templates extract and nucleic acid amplification of the quality control reference were conducted according to the kit introduction. The coincidence rates of positive and negative reference， the within-run precision and the lowest detection limit of the kits were detected according the national reference panel of Neisseria gonorrhea and were comparatively analyzed. Results The coincidence rates of positive reference and negative reference of all kits were 100%， and the CV of test results for precision was all less than 5.0%. The lowest detection limit of 10 kits was 1×103 bacteria/mL， and 3 kits was 1×102 bacteria/mL among them. But the CV of the other 2 kits was only 1× 104 bacteria/mL. Conclusion The twelve PCR kits for Neisseria gonorrhea are reliable. 　　[Key words] Neisseria gonorrhea； Kit； National reference panel； Real-time PCR 　　淋球菌常可引起人类泌尿生殖系统化脓性感染，俗称淋病。淋病是我国发病率较高的性传播疾病之一，及早发现和有效治疗是控制淋球菌感染的有效方式[1-2]。目前用于淋球菌的检测方法很多，如涂片法、培养法、免疫学检测法[3]、酶法[4]、核酸检测法等。近年来淋球菌的核酸检测以其快速、灵敏成为主流方法[5-6]，目前国内已有17家企业的淋球菌核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）、7家企业的淋球菌、解脲脲原体、沙眼衣原体二联或三联核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）获得国家食品药品监督管理局的批准，尚有多家企业申报注册。本实验使用淋病PCR试剂盒质控参考品，对8家企业已上市的9种试剂盒及2015～2016年3家企业在中国食品药品检定研究院（以下简称“中检院”）申报注册的淋球菌核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）、沙眼衣原体/淋球菌核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）进行检测，并进行质量分析与评价。 　　1 对象与方法 　　1.1 淋病PCR试剂盒质控参考品 　　参考品由中检院呼吸道细菌疫苗室制备，包括10份阳性参考品（NG-P1～NG-P10）、10份阴性参考品（NG-N1～NG-N10）、5份精密度参考品（NG-R）和1份最低检出限参考品（NG-S），共计26份，批号：210015-201511。 　　1.2 试剂与仪器 　　试剂盒A～I为已上市销售的8家