高三生物基因工程项目基本内容教案(人教大纲版).docVIP

高中生物辅导网/ 京翰教育中心/ 基因工程的基本内容 一. 本周教学内容： 基因工程的基本内容 学习内容： 本周学习基因工程的操作过程，指导进行基因工程操作时需要的基本工具：限制酶、连接酶、运载体，了解他们的特点，及其在基因工程中的应用。理解基因工程操作的基本步骤，理解如何提取目的基因，怎样将目的基因导入受体细胞，怎样鉴定试验的成果等等。了解基因工程对现代社会的贡献及基因工程应用的发展。 三. 学习重点： 1. 基因工程的概念 2. 基因工程的操作工具 3. 运载体的基本条件 4. 基因工程的基本操作步骤 5. 基因工程的应用和发展 四. 学习难点： 1. 基因工程工具：限制酶、运载体 2. 运载体的基本要求 3. 基因工程的操作步骤 4. 如何检测基因操作 5. 基因工程应用的两面性 五. 学习过程： （一）概念：基因工程——又叫基因拼接技术或DNA重组技术。 是指在生物体外，通过对DNA分子进行人工“剪切”和“拼接”，对生物的基因进行改造和重新组合，然后导入受体细胞内进行无性繁殖，使重组基因在受体细胞内表达，产生出人类所需要的基因产物。 概念要点： 1. 在DNA分子水平上进行设计操作的 2. 在生物体外实现的基因改造 3. 对受体细胞进行无性繁殖 4. 重组基因最终表达获得性状 （二）基因操作的工具 1. 抗虫棉的培育：将抗虫的基因从某种生物（如苏云金芽孢杆菌）中提取出来，“插入”到棉花的细胞中，与棉细胞中的DNA结合起来，在棉中发挥作用。 2. 技术要点 首先：从苏云金芽孢杆菌的一个DNA分子上辨别出所需要的基因，并且把它切割下来 其次：将切割下来的抗虫基因与棉的DNA“缝合”起来 A. 基因的剪刀——限制性内切酶 全称： DNA限制性内切酶（以下简称限制酶）。 来源：主要来自于微生物中（目前已经发现了200多种限制酶） 特点：一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的切点上切割DNA分子 例如：从大肠杆菌中发现的一种限制酶只能识别GAATTC序列，并在G和A间切开。 补充知识： 1. 限制性内切酶可以水解侵入细菌的外源性DNA分子，保护细菌自身 2. 每种限制性内切酶能识别DNA中4—6个核苷酸的特殊序列 3. 细菌自身相同序列被修饰（甲基化）而不被水解 4. 限制酶能产生交错切口，形成粘性末端 B. 基因的针线——DNA连接酶 黏性末端：被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，它们之间正好互补配对，这样的切口叫做黏性末端。 DNA连接酶：两种来源不同的DNA用同一种限制酶来切割，然后让两者的黏性末端通过互补的碱基黏合起来，DNA连接酶在断口处把两条DNA末端之间的缝隙“缝合”起来——形成共价键 C. 基因的运输工具——运载体 作用：要将一个外源基因，送入受体细胞。 条件： ① 能够在宿主细胞中复制并稳定地保存 进行复制、表达 ② 具有多个限制酶切点 以便与外源基因连接 ③ 具有某些标记基因 便于进行筛选 常用运载体：质粒、噬菌体和动植物病毒等。 质粒：是基因工程最常用的运载体，最常用的质粒是大肠杆菌的质粒 存在于许多细菌以及酵母菌等生物中，是细胞染色体外能够自主复制的很小的环状DNA分子。 特点：① 含有抗性基因：大肠杆菌质粒中常含抗药基因，如：抗四环素的标记基因 ② 基因组很小：细菌质粒的大小只有普通细菌染色体DNA的百分之一 ③ 质粒能够“友好”地“借居”在宿主细胞中。一般来说，质粒的存在与否对宿主细胞生存没有决定性的作用。 ④ 质粒的复制则只能在宿主细胞内完成。 来源：大肠杆菌、枯草杆菌、土壤农杆菌等细菌中都有质粒。（土壤农杆菌很容易感染植物细胞，使细胞生有瘤状物。培育转基因植物时，常常用土壤农杆菌中的质粒做运载体。） 六. 基因操作的基本步骤 （一）取目的基因 目的基因:是人们所需要的特定基因 苏云金芽孢杆菌中的抗虫基因 植物的抗病（抗病毒、抗细菌）基因 种子的贮藏蛋白的基因 人的胰岛素基因、干扰素基因等 主要途径：① 从供体细胞的DNA中直接分离基因 ② 人工合成基因。 1. 直接分离基因:最常用的方法是“鸟枪法”，又叫“散弹射击法”。 具体操作：供体细胞中的DNA切成许多片段重组DNA 受体细胞（大量复制）基因扩增分离含有目的基因的细胞把带有目的基因的DNA片段分离出来 优点：操作简便 缺点： ① 工作量大，具有一定的盲目性 ② 真核细胞的基因含有不表达的DNA片段，不能直接用于基因的扩增和表达 主要应用：如许多抗虫、抗病毒的基因都可以用上述方法获得。 2. 人工合成基因： （1）逆转录法 以目的基因转录成的信使RNA为模板，反转录成互补的单链DNA，然后在酶的作用