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生物膜法应用于湿地恢复监测适用性研究 　　摘要：生物膜法是理想的群落水平水生态监测的方法，能够全面反映湿地恢复前后生态健康水平，生物膜法具有重要的研究意义和应用前景。以四川省邛海湿地五期恢复工程为研究对象，综合运用原位生物膜法、群落分析法和生理生态学方法，通过比较五期湿地恢复工程建设前、建设期和恢复期的生物膜结构和功能指标的变化，分析生物膜对湿地恢复工程不同时期的响应情况。结果表明，湿地恢复工程施工对生物膜的结构和功能产生显著影响，其中对藻类结构和细菌胞外酶活性影响最大。基于所分析的各项指标，天然基质生物膜对湿地恢复具有很好的响应，生物膜法适用于湿地恢复的生态监测，可进一步建立评价方法并推广应用。 　　关键词：生物膜；湿地恢复；生态监测 　　中图分类号： Q948；X17文献标志码： 　　文章编号：1002-1302（2016）08-0506-05 　　湿地是界于水域和陆地之间的具有一定生态功能的交错地带[1]。它在为人类提供生产、生活等各种资源的同时也发挥着调节径流、降解污染、调节气候等环境生态作用，被誉为“地球之肾”。然而，随着人类社会的不断发展及气候变化等自然因素，湿地面临着不断退化的威胁。因此，为缓解湿地与人类发展需求之间的矛盾，人工恢复湿地逐步成为湿地保护和利用的重要补偿性办法，并引起社会各界人士的广泛关注[2]。而对湿地恢?凸?程的跟踪监测对于科学恢复湿地、管理湿地以及客观评价湿地恢复效果等工作具有重要意义[3]。 　　湿地恢复监测的方法和指标，主要集中于对湿地水文、水环境、湿地土壤、气象及湿地生物的监测[3-5]，而常用的湿地恢复效果评价方法包括能值分析法、湿地生态系统健康评价法以及景观格局分析法[6-7]。但通过对湿地的植被、水鸟等动植物的生物监测发现，因生境破碎化严重、水生生物大量灭绝、调水等问题为生物监测带来困难，传统的生物监测已不能满足其生态监测的需求[8]。而生物膜普遍存在于各种基质的表面上[9]，代表了一种稳定微生物细胞组成的复杂混合物的微生态系统，对水质、水量、土地利用类型等环境压力会产生响应[10-11]，因而生物膜法是理想的群落水平水生态监测的方法[12]。 　　邛海位于四川省凉山彝族自治州西昌市东南面，距城区仅4.5 km，是非常特殊的城郊型湿地。本次选取对原农田湿地进行了全方位改造的五期湿地恢复工程为研究对象，通过分析生物膜结构和功能指标的变化，来研究生物膜对湿地恢复工程不同时期的响应情况，以期为生物膜监测应用于湿地恢复评价中提供依据。 　　1材料与方法 　　1.1研究区概况 　　邛海位于四川省西昌市，流域面积307.67 km2，系四川省第二大淡水湖泊。20世纪中后期以来，填海造田、围海造塘、泥沙淤积、气候变暖等各种人为、自然因素使邛海的蓄水面积由31 km2减少至27 km2，邛海的湿地生态功能受到严重破坏，水质恶化严重。为了控制湿地的不断退化，充分发挥湿地的生态环境功能，从2009年开始，西昌启动总面积约为 1 333 km2，依据各自特色分六期规划完成的邛海生态保护与湿地恢复工程建设。本次研究点“梦回田园”五期湿地于2014年5月正式开工建设，2014年12月22日竣工开园，建有5个以“河”为主题的自然生态区域，该期湿地通过恢复临水天然湿地，改造和保留农用土地来达到其目的。 　　1.2生物膜的采集 　　本研究分别于2014年4月（建设前）、6月、8月、10月、12月（建设期）及2015年4月（恢复期）在邛海五期湿地恢复区（S1）进行样品采集，并选取已完工5年的邛海一期湿地（S2）作为参照点。各湿地沿湖岸设3个采样点，每个采样点随机选取2处间隔50 m以上的石头进行采样，所采集的生物膜用0.2 μm滤膜过滤后的样点水悬浮，一份加入5%甲醛固定，用于藻组成识别分析；所有样品用冰盒保存带回实验室用于分析其生物量、酶活性指标的变化。 　　1.3生物膜各指标的分析 　　生物膜各指标分析方法参照前期相关研究中的方法[8，13]，实验室测定生物膜的叶绿素含量（叶绿素a、叶绿素b、叶绿素c）、无灰干质量（AFDM）、藻类组成、磷酸酶（APA）活性、胞外聚合物多糖（PSC）含量。 　　1.4水样采集与理化指标测定 　　同步采集水样，保存以及测定参照《水和废水监测分析方法（第4版）》，现场测定pH值、温度（T）、透明度（Trans）、溶解氧（DO），实验室测定氨氮（NH3-N）、总氮（TN）、总磷（TP）、化学需氧量（COD）、高锰酸盐指数（CODMn）、生化需氧量（BOD5）、氟化物（F-）等指标，并使用叶绿素a、TN、TP、Trans、CODMn等5项指标计算综合营养指数（TSI）。 　　2结果与分析 　　2.1生物量 　　对邛海五期湿地恢复区（S1）不同时期