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- 2018-09-17 发布于福建
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糖胺聚糖荧光标记及其与硫酸软骨素抗体相互作用
糖胺聚糖荧光标记及其与硫酸软骨素抗体相互作用
摘 要 以1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)-碳化二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺为催化剂,将糖胺聚糖(肝素、硫酸乙酰肝素、硫酸软骨素A,B,C,D,E)中糖醛酸的羧基与氨基荧光素中氨基偶联,分别得到各荧光标记糖胺聚糖。将标记糖胺聚糖用点样仪点在硝酸纤维素包被玻璃芯片上,分别探讨其在硝酸纤维素薄膜上的保留率及其与硫酸软骨素抗体(克隆号CS-56)的相互作用。结果表明,各种糖胺聚糖在硝酸纤维素膜中保留率显著不同,硫酸软骨素E(51.7%)>硫酸软骨素A(19.5%)>硫酸乙酰肝素(16.4%) >肝素(14.1%) >硫酸软骨素B(12.3%) >硫酸软骨素D(10.8%)>硫酸软骨素C(10.7%);定量计算得各种糖胺聚糖与CS-56结合能力: 硫酸软骨素C>硫酸软骨素D>硫酸软骨素A>硫酸软骨素E,硫酸软骨素B、肝素及硫酸乙酰肝素与CS-56无结合。
关键词 糖胺聚糖;荧光标记;糖芯片;硫酸软骨素抗体
1 引 言
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糖芯片是继基因芯片、蛋白芯片之后又一新兴的生物芯片技术,它是根据糖与其它生物分子之间的特异性结合,将微量糖类化合物以共价或非共价作用固定于芯片上,进而对蛋白质、活体细胞、微生物等进行检测、分析的方法。因其具有用量少、通量高、灵敏快速及信息量大等优点,已成为糖组学研究的强有力工具。目前,
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