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葱属植物改良中组织培养研究进展 　　摘要：对葱属植物组织培养各个方面的研究现状进行了综述，包括器官培养、胚培养、单倍体培养和原生质体培养。并评述了这些生物技术在葱属植物遗传育种和品质改良中的应用前景。同时对现有工作中存在的不足进行了总结。 　　关键词：葱属植物；组织培养；再生植株 　　中图分类号：Q943.1　文献标识码：A　文章编号：1006－6500(2008)04－0010－05 　　 　　葱属植物(Allium)属百合科，约有500个种，我国有70-80种。其中多种为重要蔬菜，如葱、洋葱、蒜、韭和薤等。还有一些野生种亦可食用，如山韭、阿尔泰葱、沙葱等。这些野生种具有抗寒、抗热、抗旱、抗病等特征，有的还有药用价值，是有用的遗传资源库，对于栽培种的改良具有潜在开发应用价值。葱属植物的离体培养已有不少报道，且多集中在洋葱、蒜、葱和韭等少数几种植物上，笔者就此做一总结。 　　 　　1　组织和器官培养 　　 　　大蒜、洋葱等的茎尖是组织培养的优良外植体，剥离一定大小的茎尖进行培养可以达到脱毒、快繁的效果。洋葱的茎盘、鳞茎、花，大蒜的未展开叶、气生鳞茎、蒜瓣，大葱的叶片、花蕾，韭菜的叶片、根尖都是组织培养中常用的材料，能够诱导再生植株产生。 　　大蒜的病毒病是造成大蒜品质降低、种性退化的主要原因。到目前为止，发现能侵染大蒜的病毒有11种，且均为复合侵染型，主要包括洋葱黄矮病毒(OYDV)、韭菜黄条病毒(LYsT)和亚实基隆潜引病毒(sLV)、马铃薯Y病毒(PVY)、马铃薯s病毒(PVS)、马铃薯A病毒(PVA)、马铃薯M病毒(PVM)、烟草花叶病毒(TMV)和香石竹潜引病毒(CLV)等。在日本，大蒜主要受大蒜花叶病毒(GMV)和大蒜潜引病毒侵染。而中国主栽大蒜主要受LYSV、sLV和PVY 3种病毒侵染。 　　最早的大蒜脱毒方法是利用热处理，但该法不能去掉GMV病毒。20世纪80年代开始，我国的大量学者进行了这些方面的尝试和研究，包括利用大蒜鳞茎幼芽及下部带茎盘组织接种，带一个或不带叶原基的大蒜分生组织接种等。试验多采用MS和B5培养基，使用生长调节物质2,4-D、BA和NAA等，所得试管苗经田间试验显示，脱毒大蒜的蒜薹产量比对照增加58％-175％，鳞茎增产23％-114％，增产的原因在于减轻了病毒病的危害，改善了植物的自身营养，叶面积增加，叶绿素含量明显提高等。然而脱毒植株在实际应用中可能再度感染，加之试管繁殖系数尚低。因而规模化生产技术还需进一步研究。 　　洋葱的茎尖培养也进行了较多研究，但研究多采用MS培养基，并附加BA和NAA等生长调节物质。然而Phillips和Luytem发现，毒莠定(picloram)对洋葱茎尖培养的效果比NAA更好。试验证明洋葱、阿尔泰葱、实亭葱等茎尖在含毒莠定和6-BA的培养基上还诱导出了体细胞胚。 　　根尖是分生组织培养的另一材料来源，并已开始受到重视。较之茎尖，根尖取材要方便的多。Shuto等对韭菜和大葱0.2～0.3mm的根尖部位进行培养，在附加NAA 1.0mg／L的MS培养基上诱导出了愈伤组织，在含6-BA 0.01mg／L的培养基上分化出植株，并形成脱毒种质。此外，据报道用大蒜茎尖产生的小植株的根尖切断作外植体，在含2,4-D条件下可形成愈伤组织，转入附加毒莠定和2ip的培养基后分化出体细胞胚和再生植株。 　　葱属植物组织培养所用起始材料种类很多。除了分生组织外，还可从茎盘、幼叶、花器官、鳞片等部位取材。Fridberg曾用附加NAA和KT的MS培养基从洋葱鳞片直接诱导成芽。大蒜以及大葱器官诱导的愈伤组织均能成功地分化出植株，后者还可开花结实。有人用一种韭的籽苗基部诱导出了体细胞胚和高频率再生植株。 　　Ayabe和sumi新近建立了一种生产大蒜脱毒试管苗的新方法――茎盘培养法(stem discdome culture)。该法以未成熟的鳞茎基部的茎盘作外植体，以不加外源激素的Is为培养基，一个茎盘可分化出20-30株苗，一个月内即可形成小鳞茎，在土壤中移栽后发现，此法获得的植株叶片无病毒感染症状。Sata利用附加2,4-D1.0mg／L和KT0.5mg／L的White培养基和大蒜小鳞茎基部直接诱导出了体细胞胚，其诱导率高达60％。 　　葱属植物为伞形花序，每个花序有上百朵小花，这些小花和花苞内产生的许多气生鳞茎都是组织培养的良好外植体。而利用洋葱和韭菜的花序、未成熟花芽、花托㈣以及大葱、洋葱和山韭的花蕾、大蒜的花梗等也均可有效地诱导出再生苗。这些方法使用的培养基基本上都是MS，BDS和N5，而且有可能使大葱的繁殖系数增加一万倍以上。 　　 　　2　胚培养 　　 　　胚培养(embryo culture)是植物组织培养的一个主要方面，早在20