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底物浓度对反应速度的影响-雅安职业技术学院
随着底物浓度的增高 反应速度不再成正比例加速;反应为混合级反应。 [S] V Vmax 当底物浓度高达一定程度 反应速度不再增加,达最大速度,反应为零级反应 [S] V Vmax 底物浓度与酶促反应速率的定量关系: 米-曼氏方程式 V Vmax[S] Km + [S] = ── [S]:底物浓度 V:不同[S]时的反应速度 Vmax:最大反应速度 Km:米氏常数 Km值 酶促反应速度为最大反应速度一半时的底物浓度 即当 V= Vmax / 2 时, 意义: a) Km是酶的特征性常数 (Km 只与酶的性质有关, 与酶的浓度无关) Km可反应酶对底物的亲和力 (Km越小,亲和力越大) 2 = Km + [S] Vmax Vmax[S] Km=[S] 三、温度对反应速度的影响 最适温度:酶促反应速度最快时的环境温度 低温时降低酶活性, 温度回升酶活性可恢复 高温可使酶变性失活,不可恢复 低温降低酶活性的应用 贮存生物制品、菌种等 低温时由于活化分子数目减少,反应速度降低,但温度升高后,酶活性又可恢复 临床上的低温麻醉 减少组织细胞的代谢程度,提高机体手术时对氧和营养物质的耐受性 四、 pH对反应速度的影响 不同的的pH下酶的解离状态不同,这直接影响酶与底物的结合 或影响酶的空间结构, 从而改变酶的活力。 五、激活剂对反应速度的影响 使酶从无活性变为有活性或使酶活性增加的物质称为酶的激活剂。可分为必需激活剂和非必需激活剂 酶的激活剂: 无机离子(如Mg2+、Ca2+、K+、Cl- ) 简单有机物(如半胱氨酸,还原型谷胱甘肽等) 六、抑制剂对酶促反应速度的影响 酶的抑制剂(inhibitor,I) 凡能使酶的催化活性下降而不引起酶蛋白变性的物质称为酶的抑制剂 抑制作用的类型 不可逆性抑制 可逆性抑制 竞争性抑制 非竞争性抑制 反竞争性抑制 (一) 不可逆性抑制作用 通常以共价键与酶活性中心的必需基团相结合,使酶失活的抑制剂 举例: 有机磷农药中毒:有机磷农药与胆碱酯酶活性部位丝氨酸的羟基共价结合 ,使酶失活(可用碘解磷定解毒) 重金属中毒:重金属离子是巯基酶的不的巯基共价结合(可用二巯基丙醇解毒) 青霉素抗菌:青霉素与转肽酶共价结合,使酶失活 (二) 可逆性抑制作用 抑制剂通常以非共价键与酶或酶-底物复合物可逆性结合,使酶的活性降低或丧失;抑制剂可用透析、超滤等方法除去,酶活性可恢复 1. 竞争性抑制作用 [S][I]:高浓度的底物可解除抑制 动力学参数:Vmax值不变,Km值增大 知识链接 磺胺类药物的抑菌机制 磺胺类药物与对氨基苯甲酸竞争性结合二氢叶酸合成酶的活性中心,影响二氢叶酸的合成,细菌核酸合成受阻,生长繁殖受抑制。 对氨基苯甲酸 2. 非竞争性抑制 抑制剂与酶的活性中心外的位点结合,形成的ESI三元复合物不能分解产物P,抑制程度取决于抑制剂的浓度 动力学参数:Vmax值降低,Km值不变 + S - S + S - S + ESI EI E ES E P 3.反竞争性抑制 酶只有与底物结合后才能与抑制剂结合 动力学参数:Vmax值降低,Km值减小 第五节酶与医学的关系 一、 酶与疾病的发生 白化病 丙酮酸尿毒症 二、 酶与疾病的诊断 甲胎蛋白 早期肝癌 血清及尿液中的淀粉酶 急性胰腺炎 乳酸脱氢酶同工酶谱 急性心肌梗死 三、 酶与疾病的治疗 通过抑制酶活达到治疗目的:如磺胺类药物抑菌 直接用于治疗的酶: 帮助消化的:胃蛋白酶、胰蛋白酶、胰脂肪酶 外科手术的:溶菌酶、纤溶酶、木瓜蛋白酶 防治血栓的:链激酶、尿激酶、纤溶酶 四、酶在医学上的其他应用 固定化酶 将水溶性酶经物理或化学方法处理后,成为不溶于水但仍具有酶活性的一种酶的衍生物。增加酶的稳定性和使用寿命。 抗体酶 具有催化功能的抗体 分子,具有高度的专 一性 谢 谢 * * 生 物 化 学 雅安职业技术学院药学检验系生化课程组 《生物化学》课程资源建设 第三章 酶 酶的结构与功能 3 概述 酶的作用机制 影响酶促反应速度的因素 3 4 2 1 酶与医学的关系 5 主要内容 3 第1节 概述 3 一、酶的概念 酶(Enzyme,E):是一类由活细胞产生的,对其特异底物具有高效催化作用的蛋白质。 酶所催化的化学反应称为酶促反应。酶促反应中被酶催化的物质(基质、作用物)称为底物(S),催化反应所生成的物质称为产物(P)
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