半夏泻心汤对糖尿病大鼠cajal间质细胞、肠神经系统及cbs的影响-内科学(消化系病)专业论文.docxVIP

安徽医 安徽医科大学硕士学位论文 PAGE PAGE 10 英文缩略词表 (Abbreviations) 英文缩写 AP 英文全称 Ammonium persulfate 中文全称 过硫酸铵 DM Diabetes mellitus 糖尿病 STZ Streptozotocin 链脲佐菌素 ICC Interstitial cells of Cajal Cajal 间质细胞 PGP9.5 Protein gene product 9.5 蛋白基因产物 9.5 SP Substance P P 物质 CBS Cystathionine-β-synthase 胱硫醚-β-合成酶 ENS Enteric nervous system 肠神经系统 H2S SYP Hydrogen sulfide Synaptophysin 硫化氢 突触素 PBS Phosphate buffered saline 磷酸盐缓冲液 TBST Tris Buffered saline Tween 洗膜缓冲液 SDS Sodium dodecyl sulfate 十二烷基硫酸钠 SCF Stem cell factor 干细胞因子 c-kit proto-oncogeneprotein c – kit 原癌基因 SMC Smooth muscle cells 平滑肌细胞 CSE Cystathionine-γ-lyase 胱硫醚-γ-裂解酶 TBST TBS+Tween 三羟甲基氨基甲烷缓冲液 TEMED Tetramethylethylenediaminse 四甲基乙二胺 PVDF polyvinylidene difluoride 聚偏二氟乙烯 ANOVA Analysis of Variance 方差分析 LSD Least-significant difference 多重比较 IP Intraperitoneal injection 腹腔注射 半夏泻心汤对糖尿病大鼠 Cajal 间质细胞、 肠神经系统及CBS的影响 中文摘要 目的 探讨半夏泻心汤对糖尿病(diabetes mellitus, DM)大鼠 Cajal 间质细胞(interstitial cells of Cajal, ICC)、肠神经系统（Enteric nervous system，ENS）以及胱硫醚-β-合 成酶(cystathionine-β-synthase, CBS)的影响及其可能的作用机制。 方法 1.糖尿病大鼠模型诱导 将60只健康雄性SD大鼠设为正常对照组、糖尿病模型组 （DM模型组）、半夏泻心汤组（中药组）和多潘立酮组（西药组）。除正常对照组 外，所有大鼠行一次性腹腔注射(ip)链脲佐菌素(STZ，55 mg/kg)诱导糖尿病大鼠模 型。所有糖尿病大鼠饲养6周后再选取成功模型。 2.干预方法 中药组每天给予半夏泻心汤[5.4 g/(kg.d)]灌胃，西药组每天给予多潘 立酮[5 mg/(kg.d)]灌胃，DM模型组及正常对照组每天给予等量生理盐水，每天1次， 持续灌胃8周。 3.一般情况 诱导糖尿病模型成功后观察大鼠的饮食、饮水、粪便、毛色及精神状 况，每周测体重、检测鼠尾末端血糖。 4.胃残留率、小肠推进率测定 干预8周后禁食12小时，予预先调制的黑色半固体 营养糊(1 mL/100g)灌胃。30分钟后注射10％水合氯醛麻醉开腹，快速结扎幽门和 贲门后取出胃，结扎幽门和回盲部，无张力下分离肠系膜。胃残留率（%）=(胃总 重-胃净重)／糊重×100％。测量从幽门至回盲部的总长度作为小肠总长度，从幽门 至营养糊黑染所在的距离作为小肠推进长度。小肠推进率（%）= 营养糊推进距离 (cm)／小肠全长(cm)×100％。 5.免疫组化SP法检测胃窦组织c-kit 、SCF；空肠组织c-kit、SCF、SYP、PGP9.5、 SP、CBS表达的变化 将四组实验大鼠胃窦、空肠组织标本的石蜡切片通过免疫 组化SP法、图像分析观察胃窦ICC及肠神经丛、CBS阳性细胞表达的分布及变化。 6.Western blot检测空肠组织c-kit、SCF、CBS蛋白的表达 分别将四组实验大鼠空 肠组织标本提取蛋白后行免疫印迹检测，通过灰度值对比检测蛋白表达的变化情 况。 结果 1.一般情况 与正常对照组比较，DM模型组体重减轻，血糖及胃残留率升高、小 肠推进率下降，与DM模型组比较，两个用药组多饮、多食及多尿症状减轻，精神 状态好转，体重明显增加(P0.05)，胃残留率降低(P0.05)，小肠推进率增加 (P0.05)，中药组血糖降低较DM模型组降低(P0.05)。 .各组大鼠胃窦与空肠组织c-kit与SCF的免疫组化结果 与正常对照组比较，DM 模型组大鼠胃窦、空肠c-kit及SCF