胃肠癌贫血患者EPOEPO―R和MVD相关性研究.docVIP

胃肠癌贫血患者EPOEPO―R和MVD相关性研究 　　【摘要】 目的：探讨胃肠癌贫血患者EPO、EPO-R和微血管密度（MVD）表达的关系。方法：对177例胃肠癌患者进行常规方法检测Hb、血浆EPO浓度，免疫组化法检测EPO、EPO-R、MVD，并进行相关分析。结果：（1）57例贫血患者的EPO水平明显高于无贫血者（P0.05）；血清EPO水平和Hb值呈明显负相关（P0.001）。（2）EPO、EPO-R阳性患者的MVD明显高于EPO、EPO-R阴性患者（P0.05）；MVD与EPO、EPO-R呈正相关（P0.001）。结论：胃肠癌贫血患者的EPO水平明显增高，并与Hb值呈明显的负相关关系；EPO、EPO-R的表达与MVD呈正相关。 　　【关键词】 胃肠癌； 贫血； 血红蛋白； 促红细胞生成素； 促红细胞生成素受体； 微血管密度 　　消化道肿瘤最常见的是胃癌和肠癌，而往往患者在病情处于晚期时就诊者居多，且部分患者已并发贫血。胃肠癌贫血肿瘤相关性贫血（cancer related anemia，CRA）的发生率高达40%以上[1]。对于复发转移或者不能手术切除的患者多采用以化疗为主的综合疗法[2]。当患者接受化疗后发生贫血的几率急剧增加，可上升至90%[3]。贫血是由多种原因引起外周血单位容积内血红蛋白（Hb）浓度、红细胞计数（RBC）及血细胞比容（HCT）低于本地区、相同年龄和性别的人群的参考值下限的一种症状。CRA主要是指肿瘤患者在其疾病的发展过程中以及治疗过程中发生的贫血。近年来的多项研究证实肿瘤细胞株中表达较多的实属促红细胞生成素（EPO），它可调控肿瘤细胞的生长发育，引发恶性肿瘤组织中新生血管的生长。一项meta分析的研究结果表明，肺癌、头颈癌、前列腺癌、淋巴瘤和多发性骨髓瘤患者较短的存活时间均与Hb的水平降低有关，患者合并贫血的死亡风险高达54%～77%[4]。癌症患者血红蛋白浓度也是疾病发展的一个诊断因子，但是其潜在机制是复杂且未知的[5]。 　　胃肠癌患者最为常见的并发症就是贫血，贫血与许多因素有关[6]，文献对EPO、EPO-R相关性多有报道，而肿瘤性贫血与微血管密度（MVD）相关性分析结果报道不一。为了研究胃肠癌患者贫血与ERO、EPO-R浓度及MVD表达等关系。本案对177例胃肠癌患者的Hb、EPO血浆浓度及肿瘤组织ERO、EPO-R和MVD进行了检测和分析，现报告如下。 　　1 资料与方法 　　1.1 一般资料 选取2012年7月-2014年8月本院住院的胃肠癌患者177例，其中男119例，年龄34～92岁，平均（63.78±10.98）岁；女58例，年龄34～92岁，平均（63.78±10.98）岁。根据我国血液学专业制定的诊断标准，以血红蛋白值（Hb）男性120 g/L、女性110 g/L诊断为贫血。将患者按诊断标准分为贫血组57例和无贫血组120例，其中贫血组男36例，女21例，无贫血组男83例，女37例，两组患者的性别比较差异无统计学意义（ 字2=0.633，P=0.426），具有可比性。 　　1.2 方法 　　1.2.1 Hb检测 清晨抽取患者静脉血2 mL，置于EDTA抗凝管中，在2 h内应用美国Beckman Coulter公司LH-750血细胞分析仪进行Hb等血常规项目检测。 　　1.2.2 血清EPO检测 抽取1.5 mL静脉血置于K2-EDTA抗凝管中，使用全自动化学发光法免疫分析仪按照EPO检测说明书（美国德普诊断产品有限公司）定量测定血清EPO的浓度。 　　1.2.3 癌性组织EPO、Epo-R检测 　　1.2.3.1 SABC免疫组化法 制作石蜡标本4～5 μm切片3～4张；烤箱温度设置为60 ℃烘烤1 h。经过二甲苯脱蜡三缸各10 min、无水乙醇二缸各5 min等不同浓度乙醇脱苯后水冼、水化。选1张进行病理诊断复核，余分别按试剂盒说明书操作，经过SABC染色，分别检测MVD和EPO、EPO-R。阴性对照以PBS代替，阳性对照由试剂生产公司提供已知阳性切片。 　　1.2.3.2 结果判定 测定MVD采用weidner等的评判标准方先低倍镜（×40）扫视，确定FⅧ明显棕褐色微血管最密集的标记区，血管之间必须要有清楚的分离，与邻近的肿瘤细胞、微血管及其他结缔组织成分不相连，一条独立的血管应该是染色为棕黄色的EC或EC簇，对于染色标记清晰且源于同一微血管的EC，也可作为独立的MVD。计数结果换成高倍镜（×200），结果以3个视野血管的均数表示。ERO、EPO-R计数：阳性细胞胞质均呈棕黄色颗粒，至少观察5个视野（×200），各计数100个细胞。参考值：阳性细胞5%为阳性。 　　1.3 统计学处理 对实验数据的统计与分析采用SPSS 17.0统计软件，计量资