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苦豆肾茶方对免疫性前列腺炎模型大鼠ICAM―1,INF―γ,MCP―1影响 　　[收稿日期] 2013-11-21 　　[通信作者] *张建军，研究员，博士生导师，Tel：（010E-mail：zjj59@163.com 　　[作者简介] 夏立营，副主任医师，Tel：（010E-mail：xly1970@ 　　[摘要] 目的：观察苦豆肾茶方对免疫性前列腺炎大鼠前列腺组织ICAM-1，INF-γ，MCP-1的影响。方法： 采用纯化大鼠前列腺蛋白结合免疫佐剂法于第1，28天在大鼠背部多点注射建立实验性自身免疫性前列腺炎大鼠模型，并随机分为模型组、苦豆肾茶方高、低剂量组、前列泰组，另取10只大鼠背部皮下多点注射生理盐水，作为空白对照组。造模第2天开始喂药，10 mL?kg-1，苦豆肾茶方高、低剂量组灌胃苦豆肾茶方（生药9.0，4.5 g?kg-1），前列泰胶囊组灌胃前列泰（药粉0.95 g?kg-1），连续给药8周，ELISA法检测大鼠前列腺组织ICAM-1，INF-γ，MCP-1含量。结果：模型组大鼠前列腺组织ICAM-1含量较正常大鼠明显增多（P0.05），苦豆肾茶方高剂量组可明显减少ICAM-1的生成（P0.05）；模型组大鼠前列腺组织INF-γ水平与其他各组比较无明显差异；与对照组比较，模型组大鼠前列腺组织MCP-1明显增多，苦豆肾茶方低剂量组前列腺组织MCP-1明显降低（P0.05）。结论：苦豆肾茶方通过降低大鼠前列腺组织ICAM-1，MCP-1水平，起到抗炎免疫调节作用，这或许是其治疗慢性前列腺炎的作用机制之一。 　　[关键词] 苦豆肾茶方；慢性前列腺炎；自身免疫； 细胞因子 　　慢性非细菌性前列腺炎（chronic prostatitis，CAP）是中青年男性常见病，其发病机制至今尚未完全明确，近年来，自身免疫因素在CAP发生发展中的作用受到越来越多的关注[1]。苦豆肾茶方有减轻免疫性前列腺炎模型大鼠前列腺组织炎症反应的作用，可减少前列腺腺泡上皮细胞基底膜破坏，抑制炎细胞浸润，为进一步研究其作用机制，本研究观察苦豆肾茶方对自身免疫性前列腺炎大鼠前列腺组织中细胞间黏附分子1（intercellular adhesion molecule 1，ICAM-1）、γ干扰素（interferon，INF-γ） 和单核细胞趋化因子-1（monocyte chemotactic protein-1，MCP-1）表达情况的影响，从免疫调节的角度探讨苦豆肾茶方治疗慢性前列腺炎的作用机制。 　　1 材料 　　1.1 动物 清洁级健康雄性Wistar大鼠，体重220～240 g，由中国医学科学院实验动物研究所提供，许可证号SCXK（京）2005-0013 。 　　1.2 药物与试剂 苦豆肾茶方（方中苦豆子、肾茶、蒲公英水提，延胡索、土茯苓、王不留行、川牛膝醇提，丹参先醇提再水提，北京中医药大学临床中药学教研室提供，生药2 g?mL-1）；前列泰胶囊（深圳高卓药业有限公司，批号060701）；佐剂用卡介苗（中国食品药品检定研究院，批；Triton X-100（Solarbio）；大鼠ICAM-1，INF-γ，MCP-1 ELISA试剂盒（美国RB公司，批号分别为0803221，0803094，0803220）。 　　1.3 仪器 MK3酶标仪（芬兰雷勃公司）；美国RA1000全自动生化仪；LD5-2A离心机（北京医用离心机制造厂）。 　　2 方法 　　2.1 制备抗原 参考文献报道[2]配制弗氏完全佐剂（FCA）：将液体石蜡与羊毛脂按3∶1比例共热至70 ℃混匀，高温灭菌后，按5 g?L-1加入佐剂用卡介苗，无菌乳化后使用。取30只雄性Wistar大鼠，脱颈椎处死，局部皮肤消毒，下腹正中切口，分离前列腺背叶，剪除多余脂肪组织及包膜，用冷生理盐水洗净，按每克前列腺组织每毫升的比例加入含0.5%Triton X-100的生理盐水溶液（预先高温灭菌），在冰水浴上用玻璃匀浆器制成匀浆。将匀浆液3 000 r?min-1离心30 min，取上清液。以双缩脲法测定匀浆上清液的蛋白含量，以0.1 mol?L-1 pH 7.4的PBS液稀释前列腺蛋白质量浓度至20 g?L-1。研钵内放入完全弗氏佐剂，将前列腺蛋白液逐步加入FCA中，边加边同一方向研磨，使之完全乳化。 　　2.2 造模与分组 50只雄性Wistar大鼠，常规饲养1周，随机分组，每组10只，即正常对照组、模型对照组、苦豆肾茶方高、低剂量组、前列泰组。将各组动物称重后，参考文献报道造模[4]，10%水合氯醛3.5 mL?kg-1体重腹腔注射麻醉，对照组背部皮下多点注射灭菌生理盐水1 mL，其余4组动物背部皮下多