腐殖酸对NaCl胁迫下西葫芦胚轴和根生长及抗氧化特性影响.docVIP

腐殖酸对NaCl胁迫下西葫芦胚轴和根生长及抗氧化特性影响 　　摘要：以西葫芦（Cucurbita pepo）农园1号种子为材料，研究腐殖酸浸种对NaCl胁迫下西葫芦下胚轴和根的生长及抗氧化系统的影响。结果发现，适宜浓度的高活性腐殖酸稀释液浸种能缓解NaCl胁迫对西葫芦下胚轴和根的抑制作用，其中以450倍的稀释液处理效果最佳。高活性腐殖酸稀释液处理显著提高NaCl胁迫下西葫芦种子发芽率、发芽指数、活力指数、鲜质量、根长、下胚轴长、一级侧根数及下胚轴与根中超氧化物酶、过氧化物酶活性，并降低下胚轴与根中丙二醛含量。结果表明，高活性腐殖酸能缓解 NaCl 胁迫对西葫芦下胚轴和根生长的抑制作用，增强西葫芦种子的抗盐性。 　　关键词：腐殖酸；西葫芦（Cucurbita pepo）；种子；NaCl；胁迫；抗氧化酶；萌发 　　中图分类号： S642.601 文献标志码： A 　　文章编号：1002-1302（2016）09-0189-03 　　近年来我国设施蔬菜生产发展迅速，设施内长期不合理地施用化学肥料和过量地喷施农药，造成土壤盐泽化程度不断加重，肥力下降，病虫害发生严重，导致蔬菜产量品质逐渐下降，严重制约了设施蔬菜栽培的可持续发展[1]。西葫芦为我国主要的设施瓜类蔬菜，而盐害严重影响西葫芦的产量和品质。因此，研究解决设施土壤盐泽化、提高西葫芦抗盐害栽培技术措施已成为普遍关注的生产问题[2]。 　　腐殖酸是自然界中广泛存在的有机高分子物质，它具有活化作用，不仅能增加植物体内氧化酶活性及代谢活动，还能改善土壤结构性质，最终提高根系吸收水分及养分的能力[3-5]。郭伟等研究表明，腐殖酸浸种可有效缓解盐碱胁迫对小麦的影响[6]。但目前还没有关于腐殖酸对盐胁迫下西葫芦种子萌发影响的报道，因此本试验通过腐殖酸浸种，在NaCl胁迫条件下测定西葫芦种子萌发及根和下胚轴生长的变化，研究腐殖酸浸种对NaCl胁迫条件下西葫芦根和下胚轴抗氧化系统的影响，以期为揭示西葫芦耐盐胁迫机理和提高西葫芦抗盐胁迫途径提供理论参考，此外也为寻求提高盐碱地区西葫芦的生产提供理论依据和实践指导。 　　1 材料与方法 　　1.1 试验材料 　　以西葫芦（Cucurbita pepo）农园1号为试验材料；NaCl纯度99%，由Life Science Products Services公司生产）；高活性腐殖酸液剂由江苏新沂市苏蒙肥业有限公司提供。 　　1.2 试验设计 　　试验设置6个处理，具体为：（1）不用高活性腐殖酸液剂浸种不加NaCl，设为CK；（2）不用高活性腐殖酸液剂浸种加NaCl，设为T1；（3）腐殖酸50+NaCl（稀释50倍高活性腐殖酸液体浸种加NaCl），设为T2；（4）腐殖酸250+NaCl（稀释250倍高活性腐殖酸液体浸种加NaCl），设为T3；（5）腐殖酸450+NaCl（稀释450倍高活性腐殖酸液体浸种加NaCl），设为T4；（6）腐殖酸650+NaCl（稀释650倍高活性腐殖酸液体浸种加NaCl），设为T5。 　　挑选饱满且大小一致的西葫芦种子，用0.1%高锰酸钾消毒15 min，用去离子水反复冲洗干净，吸水纸吸干后分别用高活性腐殖酸溶液（50、250、450、650倍）和去离子水浸种8 h[（26±1） ℃]，然后置于垫入2层无菌滤纸培养皿中发芽，每皿25粒种子，重复3次。每个培养皿加8 mL 200 mmol/L NaCl溶液（CK加入等量去离子水）使滤纸湿润倾斜时皿底无溶液汇聚。将培养皿放入人工气候培养箱内避光培养[（26±1） ℃]。试验过程中隔天轮换添加1～2 mL去离子水和NaCl溶液，保持各处理NaCl溶液浓度基本维持不变。从第2天起统计发芽种子数，以胚根长为种子长度的1/2作为萌发标志[7]，腐败种子及时挑出，第7天停止发芽试验。计算发芽率、发芽指数、活力指数，测定超氧化物歧化酶（SOD）活性、过氧化物酶（POD）活性、丙二醛（MDA）含量。 　　1.3 测定项目及方法 　　发芽率（GP）=第7天发芽种子数/供试种子数×100%； 　　发芽指数（GI）=∑（Gt/Dt）（Gt指时间t内的发芽数，Dt指对应的发芽天数）； 　　活力指数（VI）=GI×S（GI为发芽指数，S为第7天测定的幼苗鲜质量）； 　　从每个处理随机选取10株幼苗，用直尺测量根长、下胚轴长，用分析天平称取幼苗的鲜质量；然后用硫代巴比妥酸法[8]测定西葫芦下胚轴和根内MDA的含量，用μmol/g表示；利用紫外分光光度计进行抗氧化酶活性的测定，用氮蓝四唑（NBT）还原法[8]测定SOD活性，以U/（g?min）表示；用愈创木酚方法[8]测定POD活性，以ΔD470 nm/（g?min）表示。 　　采用SAS和Microsoft Offic