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肺痨灵合剂制备工艺研究 　　[摘要] 目的 优选肺痨灵合剂的制备工艺。 方法 根据处方中药材性质的不同，以挥发油提取量为指标，采取水蒸气蒸馏法提取山腊梅；以黄芪甲苷含量为检测指标，通过L9（34）正交实验设计及单因素试验考察，优选其他药材水提取工艺；然后再用乙醇沉淀法除杂，最后采用热处理溶解、吐温-80增溶即得。 结果 肺痨灵合剂最佳制备工艺为加入5倍处方量水，提取煎煮2次，每次2 h，乙醇醇沉体积分数为60%，热处理时间为20 min，采用1.5%样品量吐温-80进行挥发油增溶。 结论 优选的肺痨灵合剂制备工艺稳定可行，重复性好，为肺痨灵合剂的开发提供参考。 　　[关键词] 肺痨灵合剂；黄芪甲苷；正交试验；澄清度 　　[中图分类号] R283.1 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2015）02（c）-0078-04 　　肺结核，中医称为“肺痨”，是当今世界传染病中的主要杀手，我国结核病年发病人数占全球发病人数比例为14.3%，位居世界第2位[1]，近年来其发病率不 　　断上升，严重危害到人们的身体健康，同时给公共卫生问题带来新的困难和挑战[2-3]。目前肺结核已成为我国重点控制的传染病，多地指定了肺结核定点治疗医院。现阶段肺结核的治疗主要以化学药物为主，化学药物可以使结核病灶纤维化和钙化，进而达到痊愈的效果。但该抗结核化疗过程较长，且需要联合用药，药物蓄积较多，产生各种各样毒副反应，增加了患者的痛苦[4-6]。同时结核杆菌将机体蛋白用于自身代谢，致使机体负氮平衡，营养代谢紊乱，抵抗力低下。中医药治疗肺结核注重扶助正气，提高人体抵抗力，亦能降低化学药物的毒副作用，提高患者依从性，使患者顺利完成全程治疗，因此中医药防治肺结核越来越受到人们的重视并得到广泛研究。 　　肺痨灵合剂为浙江省丽水市中医院（以下简称“我院”）自主研发口服中药制剂，该方主要由黄芪、黄精、百部、白及、山腊梅等多味中草药组成，具有滋阴润肺、健脾补肾、扶正固本之功效。前期临床试验中发现：该合剂联合常规西药辅助治疗初治肺结核，临床治愈疗效和显效方面得到显著改善；严重胃肠道反应、肝功能损害及白细胞减少等副作用的发生率显著降低，T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平均有不同程度的上升，CD8+、白介素（IL）-1及IL-6水平均有不同程度下降，表明肺痨灵合剂能够提高机体免疫功能。 　　前期临床试验中，肺痨灵合剂的制备方法为加入4倍处方量的水，浸泡0.5 h，采用全自动煎药机煎煮1 h。为促进该方更好、更广泛地用于临床，本文对其制备工艺进行了研究。根据处方中草药药效成分的性质及前期预试验结果，拟订该制剂的制备工艺路线为山腊梅采用水蒸气蒸馏法提取挥发油，水提醇沉提取其他味中药材，最后将提取物配液混合，采用L9（34）正交试验优选肺痨灵合剂提取工艺，为该制剂的进一步研究打下基础。 　　1 仪器与试药 　　1.1 仪器 　　Agilent1200高效液相色谱仪（安捷伦科技有限公司）：Alltech2000 ES蒸发光散射检测器（美国奥泰科技有限公司），Sartorius BS 124S电子天平（北京赛多利斯天平有限公司）。 　　1.2 试剂与试药 　　黄芪甲苷对照品（批号：110781-200613）由中国药品生物制品检定所提供，黄芪、五味子、麦冬、百部等中药饮片均购于杭州桐君堂医药药材有限公司，经我院制剂室林娜副主任中药师鉴定为正品，符合《中国药典》2010年版一部[7]规定。乙腈、甲醇为色谱纯，水为重蒸馏水（自制），其余试剂为分析纯，吐温-80为药用规格。 　　2 方法与结果 　　根据处方中药材的性质，山腊梅主要含有要含有1，8-桉油素（1，8-cineole）、桧烯（sabinene）、β-蒎烯等挥发油成分[8-9]，其中桉油素含量最大，采用水蒸气蒸馏法提取。黄芪、黄芩、百合、黄精等其他味药材主要药效成分为皂苷、黄酮及其苷、糖、酸、生物碱等，均易溶于水[10-23]，故采用水煎煮法提取。 　　2.1 山腊梅挥发油提取工艺优选 　　在前期预试验基础上，取处方量的山腊梅碎叶片，加入6倍处方量的水，浸泡6 h，待药材充分浸透后，采用水蒸气蒸馏法提取挥发油，分别读取1～7 h挥发油提取量，记录结果分别为2.05、2.60、3.05、3.45、3.60、3.65、3.65 mL。该提取记录结果提示：6、7 h挥发油提取量最大，但4 h后挥发油已基本提取完全，为节约时间和能源，选定挥发油提取时间为4 h。分别称取3份同批次1个处方量的山腊梅碎叶片，按照文中确定的工艺路线提取挥发油，分别记录挥发油提取量，结果提取量平均为3.38 mL，与优选的工艺提取结果接近，表明优选的提取工艺稳定可行。 　　2.2 水提取工