脯氨酸对高温胁迫下猕猴桃苗抗热性相关生理指标影响.docVIP

脯氨酸对高温胁迫下猕猴桃苗抗热性相关生理指标影响 　　摘 要:以美味猕猴桃品种秦美的组培苗为试材,研究了脯氨酸对高温胁迫下猕猴桃苗抗热性相关生理指标的影响。结果表明,脯氨酸可抑制高温胁迫下猕猴桃叶细胞膜透性和丙二醛(MDA)含量的增大,且增强了超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)和抗血酸过氧化物酶(APX)的活性,与此同时也增加了抗坏血酸(AsA)和还原型谷胱甘肽(GSH)的含量。 　　关键词:脯氨酸;猕猴桃苗;高温胁迫;抗热性;生理指标 　　中图分类号:S663.401 文献标识号:A 文章编号:1001-4942(2010)05-0044-04 　　 　　猕猴桃是一种不耐高温的果树,在高温胁迫下,其叶和果实极易发生灼烧而受到伤害。在逆境条件下高等植物体内积累脯氨酸及脯氨酸在植物抗逆中的生理作用已有报道,但这些工作大多集中在水分胁迫和渗透胁迫研究[1]。藓类植物在一定范围的高温胁迫下,其体内游离脯氨酸的含量随处理温度的升高和处理时间的延长而增加[2]。脯氨酸对高温胁迫下猕猴桃抗热性相关生理效应尚未见报道。本试验研究了脯氨酸对高温胁迫下猕猴桃苗抗热性相关生理指标的影响,以期为脯氨酸在猕猴桃生产中的应用尤其是缓解猕猴桃高温伤害提供参考。 　　 　　1 材料与方法 　　 　　试验材料为美味猕猴桃(Actinidia deliciosa C. F. Liang et A.R.Ferguson)品种秦美培养30 d生长基本一致的组培苗,继代培养基是MS+1.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA,在培养基中分别加入0(对照)、0.5、5、50 μmol/L的脯氨酸,置于25℃、光照为80 μmol/(m2#8226;s) (12h光/12h暗)培养室中培养20 d后,放入40℃培养箱中进行高温处理2、4、6、8、10 h。然后从中选取生长基本一致的叶片进行生理生化指标的测定。数据为重复测定3次的平均值,试验数据采用Excel 2003进行整理、分析和做图。 　　丙二醛(MDA)含量和细胞膜透性测定参照陈建勋等(2002)[3]的方法,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性、AsA和GSH含量测定参照高俊凤(2004)[4]的方法,抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性测定参照Nakano 和Asada[5]的方法略加修改,即在3 ml反应体系中,加入50 mmol/L、pH=7.0 磷酸缓冲液(PBS)1.8 ml 、15 mmol/L ASA 0.1 ml 、0.3 mmol/L H2O2 1 ml、酶提取液0.1 ml,以加同体积50 mmol/L pH=7.0 磷酸缓冲液(PBS)为对照,用分光光度计测定1 min内OD??290 nm值的变化,每变化0.01定义为一个酶活力单位(U),结果用U/gFW表示。 　　 　　2 结果与分析 　　 　　2.1 脯氨酸对高温胁迫下猕猴桃苗膜透性和MDA含量的影响 　　图1、2显示,随着高温胁迫时间的延长,猕猴桃叶细胞膜透性呈增大的趋势,在0~4 h脯氨酸对叶细胞膜透性的增大抑制效果不明显,而在4~10 h脯氨酸对细胞膜透性的增大则有缓解作用;MDA含量随高温胁迫时间的延长明显增加, 　　在0~6 h内脯氨酸对MDA含量的增大抑制效果不明显,而在6 h后各浓度的脯氨酸处理的猕猴桃叶细胞的MDA含量都不同程度地低于对照。所以认为脯氨酸可抑制高温胁迫下猕猴桃叶细胞膜透性和MDA含量的增大。 　　2.2 脯氨酸对高温胁迫下猕猴桃苗抗氧化酶活性的影响 　　如图3所示,在2~6 h高温胁迫下SOD活性都呈增大趋势,6 h后SOD活性都有不同程度的下降,但0.5、5 μmol/L脯氨酸处理的猕猴桃苗SOD活性高于2 h时的活性。在高温胁迫下用0.5、5 μmol/L的脯氨酸处理猕猴桃,其叶细胞SOD活性明显高于对照。 　　由图4看出,随高温胁迫时间的延长,各种浓度脯氨酸处理的CAT活性都呈现先上升后下降的趋势,且都显著高于对照,其中以5、50 μmol/L脯氨酸处理的效果最为明显。图3、4表明,脯氨酸能不同程度地提高高温胁迫下猕猴桃叶细胞中SOD、CAT的活性。 　　图5显示,随高温胁迫时间的延长,POD活性呈现先上升后下降的趋势。在0~10 h内各浓度的脯氨酸处理POD活性都高于对照,在4~10 h内,与对照差异达到显著水平,其中以5 μmol/L的脯氨酸处理效果最为明显。 　　图6表明,在高温胁迫下APX活性也呈现先上升后下降的趋势,各浓度处理在2~10 h都高于对照,差异也达显著水平,其中以50 μmol/L的脯氨酸处理效果最为明显。 　　2.3 脯氨酸对高温胁迫下猕猴桃苗AsA和