补肾健脾法对脑瘫大鼠血清TNFIGF1及脑细胞影响.docVIP

补肾健脾法对脑瘫大鼠血清TNFIGF1及脑细胞影响 　　【摘要】目的：探讨脑瘫大鼠应用补肾健脾法治疗后其血清肿瘤坏死因子（TNF）、类胰岛素生长因子-1（IGF-1）及脑细胞的变化及改变规律。方法：对19只SD大鼠，根据随机分组原则，分为脑瘫空白对照A组，补肾健脾法治疗脑瘫B组以及接受安慰剂治疗脑瘫C组，然后在0、7、14、21、30天分布测量各组SD大鼠血中TNF-α、IGF-1等细胞因子，然后处死后取脑组织观察镜下脑细胞。结果1、TNF血清浓度在各组间差异有统计学意义，表现为TNF在脑瘫接受安慰剂C组含量最高，脑瘫空白对照A组最低，而接受补肾健脾法治疗的实验B组为中间值；而IGF-1含量则表现为脑瘫接受安慰剂C组含量最低，脑瘫空白对照A组最高，而接受补肾健脾法治疗的实验B组为中间值。2、脑细胞镜下检查：提示接受补肾健脾法治疗的脑瘫实验B组其镜下脑细胞含量较接受安慰剂的脑瘫C组含量高，部分脑瘫B组老鼠脑细胞有增生现象。结论：补肾健脾法治疗脑瘫大鼠，能够显著改善其内环境中参与脑组织破坏与修复相关因子的浓度水平，表现为TNF血清含量的降低及IGF-1含量的升高，而且对脑细胞死亡及增生有一定的保护作用，有利于临床对脑瘫的早期治疗及干预。 　　【关键词】补肾健脾法；TNF；IGF-1 　　 　　脑性瘫痪根据中医的理论是先天胎禀不足、后天失养所致，而采用补肾健脾法治疗已取得了一定成绩。但由于中医的“黑匣子”治疗，对原理缺乏明确的实验室指标，这在很大程度上限制了中医药治疗的优越性。 　　本文通过对脑瘫大鼠的补肾健脾法治疗，探讨脑瘫大鼠中TNF、IGF-1等细胞因子、镜下脑细胞数量变化情况，从而明确补肾健脾法对内源性细胞生长因子的影响。 　　1资料与方法 　　1.1临床资料 　　1.1.1实验动物: 　　Sprange-Dawley大鼠19只，其中雌性10只，雄性9只，均有“浙江大学医学院附属第一医院实验动物中心”提供，SPF级别。 　　1.1.2试剂: 　　IGF-1试剂盒产品编号EK0377，敏感度5pg/ml，TNF-a试剂盒产品编号EK0526，敏感度1pg/ml，上述产品均有“武汉博士德生物工程有限公司”提供。 　　1.2实验方法 　　1.2.1实验分组 　　根据随机分组原则把19只SD大鼠分为A、B、C三个小组，其中A组为脑瘫对照组5只，B组为接受补肾健脾法治疗的脑瘫组7只，C组为接受安慰剂的脑瘫组7只。 　　1.2.2建立动物模型 　　根据“张敬东”的脑瘫制作模型方法建立SD大鼠的脑瘫模型。方法如下：痉挛型脑瘫模型组大鼠暴露右侧顶骨和额骨交界骨缝，以此骨缝为中心，钻开0.8cm×0.5cm左右方形骨瓣，取掉骨瓣形成颅骨开窗，切开硬脑膜及大脑皮质，用神经剥离子小心挖出大脑皮质及部分大脑髓质。对照组大鼠不挖出大脑皮质及部分大脑髓质。 　　1.2.3TNF、IGF-1等细胞因子的检测和镜下脑细胞观察 　　对实验B组大鼠每日灌饲以脾肾双补汤，在0、7、14、21、30天分布测量各组SD大鼠血中TNF-α、IGF-1等细胞因子，然后处死后取脑组织观察镜下脑细胞死亡、部分脑细胞增生和胶质细胞增生情况，其中以C组镜下脑细胞最少一只为+。 　　1.2.4数据的处理及统计学方法 　　实验计量数据均用X±s表示，镜下脑细胞数量采用计数计算。各组间差异采用单因素方差分析或者t检验，所有数据采用Spss13.0软件进行统计，检验水准为a=0.05。 　　2结果 　　2.15只无脑瘫模型SD大鼠（无服药）血清IGF-1平均含量0.583 pg/ml， 7只脑瘫模型SD大鼠（服药）血清IGF-1平均含量0.175 pg/ml， 7只脑瘫模型SD大鼠（无服药）血清IGF-1平均含量0.122 pg/ml， 5只无脑瘫模型SD大鼠（无服药）血清TNF-a平均含量0.123 pg/ml， 7只脑瘫模型SD大鼠（服药）血清TNF-a平均含量0.296 pg/ml， 7只脑瘫模型SD大鼠（无服药）血清 TNF-a平均含量0.421pg/ml。 　　2.2A、B、C三组SD大鼠的血清IGF-1，TNF-a分别进行统计学秩和检验，发现各组间差异均有统计学意义（P0.05）。 　　2.3A、B、C三组SD大鼠分别处死后行高倍镜下脑细胞计数：其中A组高倍下脑细胞计数平均为++++，B组高倍下脑细胞计数平均为++，C组高倍下脑细胞计数平均为+-++。（图1） 　　图1、不同组间的SD大鼠处死后镜下脑细胞改变 　　3讨论 　　脑性瘫痪，是各种原因引起的一种中枢性非进行性的脑损伤疾病，由于病因较多，因此确切发病机制也很复杂，但最近研究显示，脑瘫发病时机体的内环境也有明显的改变，特别是一些细胞因子包括免疫炎性因子如TNF，