苯环喹溴铵对变应性鼻炎黏液高分泌的作用及机制研究-药理学专业论文.docx

重庆医 重庆医科大学博士研究生学位论文 万方数据 万方数据 英汉缩略词名词对照 英文缩写 AB-PAS 英文全称 Alcian blue-periodic acid-schiff 中文全称 阿利新蓝-过碘酸雪夫 AP Ammonium persulfate 过硫酸铵 AR Allergic rhinitis 变应性鼻炎 BCQB Bencycloquidium bromide 苯环喹溴铵 CK18 Cytokeratin antibody 18 细胞角蛋白 18 DMSO Dimethyl sulfoxide 二甲亚砜 DTT DL-dithiothreitol 二硫苏糖醇 EDTA Ethylene diamine tetraacetic -acid 乙二胺四乙酸 EGF Epidermal growth factor 表皮生长因子 ELISA Enzyme-linked immunosorbent assay 酶联免疫吸附测定 ERK Extracellular regulated protein kinases 细胞外调节蛋白激酶 FBS Fetal bovine serum 胎牛血清 HE Hematoxylin and eosin 苏木精-伊红 IB Ipratropium bromide 异丙托溴铵 IL-13 Interleukin -13 白介素-13 IL-6 Interleukin -6 白介素-6 IκB Inhibitor kappa B NF-κB 的抑制性蛋白 M Muscarinic 毒蕈碱的 MAPK Mitogen-activated protein kinase 丝裂原活化蛋白激酶 Methylthiazolyldiphenyl - MTT 噻唑兰 tetrazolium bromide 1 MUC Mucin 黏蛋白 MUC5AC Mucin 5AC 黏蛋白 5AC NF-κB Nuclear factor kappa B 核转录因子-κB OVA Ovabumin 卵清白蛋白 PAGE Polyacrylamide gelelectrophoresis 聚丙烯酰胺凝胶电泳 PBS Phosphate uuffered saline 磷酸盐缓冲液 PKC Protein kinase C 蛋白激酶 C PMSF Pheylmethylsulfonyl fluoride 苯甲基磺酰氟 qRT-PCR  Quantitative real-time polymerase chain reaction  实时定量 PCR SDS Sodium dodecyl sulfate 十二烷基硫酸钠 TB toluidine blue 甲苯胺蓝 TGF-β Transforming growth factor-β 转化生长因子-β Th2 T helper type 2 辅助性 T 淋巴细胞 2 TNF-α Tumor necrosis factor-α 肿瘤坏死因子-α 2 苯环喹溴铵对变应性鼻炎黏液高分泌的 作用及机制研究 摘 要 目的 变应性鼻炎（allergic rhinitis，AR）是耳鼻咽喉-头颈外科的 常见病。鼻腔黏液高分泌是 AR 气道慢性炎症的重要病理生理改变。 初步研究表明，苯环喹溴铵（bencycloquidium bromide，BCQB）作为 一种新型的选择性 M1/M3 受体拮抗剂，对 AR 展示了良好的疗效。本 研究拟通过离体和在体两部分实验进一步探讨苯环喹溴铵对 AR 黏液 高分泌的作用效果以及具体的调控机制。 方法 第一部分离体实验中，通过改良的酶消化法分离细胞和无血 清培养法进行了人鼻黏膜上皮细胞的原代培养；给予 10-6、10-7 和 10-8mol/L BCQB 处理 15min 后，加入 100μmol/L 的卡巴可刺激，24h 后用酶联免疫吸附测定（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA） 方法测定黏蛋白 5AC（mucin 5AC，MUC5AC）的含量。第二部分在 体实验中，用卵清白蛋白（ovabumin，OVA）致敏 Sprague-Dawley（SD） 大鼠建立 AR 动物模型。给予 BCQB 治疗后，进行大鼠鼻部症状的评 估。收集鼻腔灌洗液用 ELISA 测定细胞因子（IL-6，IL-13 和 TNF-α） 的蛋白水平和组胺浓度。提取大鼠鼻黏膜总蛋白用 Western-blot 方法测 [基金项目] 国家自然科学基因 青年科学基金，鼻粘膜 MAchR 所介导的对变应性鼻炎鼻分泌亢进的炎性调控 机理研究，No3 定黏蛋白 MUC5AC，p38 丝裂原活化蛋白激酶（p38 mitogen-