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解磷突变株E652发酵条件研究 　　摘要：通过对高效解磷突变株Ｅ６５２的发酵条件进行研究，结果表明，其最适宜的碳源和氮源分别为１％蔗糖和２％（ＮＨ４）２ＳＯ４，最适培养温度３４℃，发酵液ｐＨ值控制在７．０时最利于突变株Ｅ６５２的生长，装液量为４０ｍＬ／２５０ｍＬ时菌株生长最快。 　　关键词：解磷菌；突变株Ｅ６５２；发酵条件 　　中图分类号：Ｑ９３５；Ｓ１５４．３４文献标识码：Ａ文章编号：0439－８114（２０11）07－1353-03 　　 　　Ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｎ Ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｈｉｇｈｌｙ－Ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ Ｓｔｒａｉｎ Ｅ６５２ ｉｎ 　　Ｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓ-Ｄｉｓｓｏｌｖｉｎｇ 　　 　　ＬＵ Ｊｉｎ－ｚｈｅｎ１，ＲＥＮ Ｊｕｎ１，ＸＩＯＮＧ Ｈａｎ－ｇｕｏ２ 　　（１． Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ， Ｗｕｈａｎ Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ， Ｗｕｈａｎ ４３０４１５， Ｃｈｉｎａ； 　　２． Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｆｏｏｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ ＆ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ， Ｈｕａｚｈｏｎｇ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｗｕｈａｎ ４３００７０， Ｃｈｉｎａ） 　　 　　Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｈｅ ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｏｆ ａ ｈｉｇｈｌｙ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｍｕｔａｎｔ ｓｔｒａｉｎ ｉｎ ｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓ－ｄｉｓｓｏｌｖｉｎｇ， Ｅ６５２， ｗｅｒｅ ｓｔｕｄｉｅｄ ｉｎ ｔｈｉｓ ｐａｐｅｒ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｉｎｄｉｃａｔｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍａｌ ｃａｒｂｏｎ ｓｏｕｒｃｅ ｏｆ ｔｈｉｓ ｓｔｒａｉｎ ｗａｓ １％ ｓｕｃｒｏｓｅ； while the ｏｐｔｉｍａｌ ｎｉｔｒｏｇｅｎ ｗａｓ ２％ （ＮＨ４）２ＳＯ４． Ｔｈｅ ｏｐｔｉｍａｌ ｃｕｌｔｉｖａｔｉｏｎ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ａｎｄ ｐＨ ｖａｌｕｅ ｗｅｒｅ ３４℃ ａｎｄ ７．０ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ． Ａｎｄ ｔｈｅ ｍｏｓｔ ｓｕｉｔａｂｌｅ ｖｏｌｕｍｅ ｏｆ ｃｕｌｔｉｖａｔｅｄ ｌｉｑｕｉｄ ｉｎ ２５０ ｍＬ ｃｏｎｉｃ ｂｏｔｔｌｅ ｗａｓ ４０ ｍＬ． 　　Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓ－ｄｉｓｓｏｌｖｉｎｇ ｂａｃｔｅｒｉａ； highly-effective ｓｔｒａｉｎ Ｅ６５２； ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ 　　 　　磷是植物生长不可或缺的三大营养元素之一，但土壤中９５％～９９％的磷为无效磷形式，植物很难直接吸收利用。我国有７４％的耕地土壤缺磷，磷肥施入土壤中后，易与Ｃａ２＋、Ｆｅ２＋等金属离子结合形成难溶性磷酸盐，加之黏土矿物对磷的吸附，致使磷当季利用率仅为５％～２５％［１］。资料显示，自２０世纪５０年代我国使用磷肥以来，土壤中的难溶性磷已累计储存高达６×１０７ｔ［２］。因此，提高磷的利用率一直是农学家关注的问题。 　　作为生物肥力的核心组成的微生物对土壤中磷的利用率影响很大。自前苏联学者蒙金娜于１９３５年从土壤中分离得到一种解磷巨大芽孢杆菌以后，各国学者也纷纷开始这方面的研究［３］。人们陆续发现，土壤中有很多微生物都具有溶磷能力，能将难溶性磷转化为有效磷的微生物称为解磷菌［４］，如芽孢杆菌属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、假单胞菌属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）、埃希氏菌属（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ）、欧文氏菌属（Ｅｒｗｉｎｉａ）、土壤杆菌属（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）等［５］。利用解磷细菌制成的菌肥施入土壤后，不仅能提高土壤有效磷含量，而且能够加强土壤中硝化细菌和其他有益微生物的活动、改善植物根部营养、提高作物产量［６］。因此，利用解磷细菌制成生物菌肥具有重大的开发应用价值。本试验主要研究了高效解磷突变株Ｅ６５２的适宜发酵条件，以期为工业化生产提供理论参考依据。 　　１材料与方法 　　１．１材料 　　１．１．１ 菌种解磷突变株Ｅ６５２由武汉生物工程学院微生物实验室选育［７］所得。 　　１．１．２培养基发酵培养基：碳源（玉米粉、可溶性淀粉、麦芽糖、葡萄糖、蔗糖）１．０％，氮源［（ＮＨ４）２ＳＯ４、ＮＨ４Ｃｌ、ＫＮＯ３、ＮＨ４ＮＯ３、蛋白胨］２．０％，ＣａＣＯ３ ０．１％，ＭｎＳＯ４ ０．１％，Ｋ２ＨＰＯ４ ０．１％，ｐＨ值７．２。 　　１．２方法 　　１．２．１培养方法取１ ｍＬ菌悬液接种到装有５０ ｍＬ发酵培养基的２５０ ｍＬ三角瓶中，同时做不接种对照（培养基中加入１ ｍＬ无菌水），于３５℃、１２０ ｒ／ｍｉｎ条件下振荡培养４８ ｈ。所有处理均做３次重复。 　　１．２．２发