丁醇高产菌的选育及小麦淀粉废水与木薯发酵生产丁醇的研究-发酵工程专业论文.docxVIP

mmllmm棚 mmllmm棚 1111111111111 T1H51511 摘要 随着石化资源问益耗竭，各国开始宽视可再生资源的利用。丁醉是重要的有机淄剂 和化工原料，作为牛物燃料，性能优于乙醉。丁醉发酵中，原料成本占总成本的比例高 达 60←70% ，并且由于丁醇对菌体的毒害作用，…般总溶剂产最只有 18 20glL，洛剂 得率为 0.34g1go 溶剂产量低、生产成本高，使发酵法无法与石油化工竞争。本文跑过丁 醉浸泡及 N+ 束注入诱变筛选丁醉耐受性强、榕剂产最高的菌种，并用小麦淀粉废水与 木薯等廉价原料代臂玉米，降低生产成本，提高生物丁醉的竞争力。 j醒过丁醉浸泡处理，筛得高耐受性商株 BR30-2 ，丁醉产量达11.77g/L，比出发菌 提高 16.65%。再经N+ 柬注入诱变，筛得高产商 BH-9 ，丁醉与总溶剂产量分别达14.5 1g1L 、 23.l4g/L 较出发菌提高 43.81% 、38川%， BH-9 稳定性良好。 研究了电子转移介体、有机酸盐、 pH 缓冲剂、还原剂以及震荡和通气对丁醉发酵 的影响。刃天青低于 0.50%0时可用作筛选商还原力菌株的指示剂。电子转移介体中，中 性红显著提高丁醉比例:亚甲基蓝调控作用不明显:甲苯版蓝抑制作用较强。有机酸盐 均可提高榕剂产量，添加 0.30% 乙酸饷或 0.10%丁酸铀时，丁醇产量分别达 16.20glL 、 J 16.59g1Lo pH 缓冲剂中， K2HP04 可以促进溶剂生成，浓度为 0.40%时丁醇产量达 16g1L; CaC03、两种缓冲盐(Na2HP04:阳七P04=1:1) 不利于溶剂生产。还原剂 Na2S 、L半脱氨酸 盐酸盐、 Vc 均不利于丁醉发醉。 1日j 歇震荡对溶剂产量影响不大;不同发酵时期边气对 发酵影响效果不问:相同发酵时期，通气时间越长，氧气对菌体抑制作用越明显。 小麦淀粉废水中添加木薯进行丁醉发酵试验，通过单因子试验和正交试验确定的优 化培养基配方为:木薯粉 5%，蛋白A3% ，丁酸纳0.10%，K2HP040 .1 0%。最适培养条 件为:温度 37C ，初始pH7 ，种龄24h ，接种最3% ，装液量110mL/250mL 发酵周期 80h。丁醉与总溶剂产量达19.32g/L、32.34g1L 溶剂产量与溶剂得率分别比玉米丁醉提 高 61.70%、21川%，生产成本大大降低。 关键词:丁醉浸泡; N+柬注入诱变:丁醉:代谢调控:优化 Abstract Abstract With the depletion of fossil resources ，people paid attention to using renewable resources. Butanol is an important organic solvent and chemical material. As a promising new biofuel ， butanol is better than ethanol.However，raw materials price almost accounts for 60%-70% of the total production costs. As butanol is toxic to the bacteria ，solvent and productivity are only 18-20glL and 0.34g/g respectively. When competing with chemical synthesis，fermentation had no advantage because of low solvent yield and high production cost. In this pape飞 high butanol tolerance and butanol 吁rielding strains were bred a白er high concentration of butanol soaking and N+ beam implantation. Using wheat starch wastewater and cassava instead of com as raw materials for butanol fennentation ，production costs were reduced ，competitivity was improved accordingly. A high butanol tolerance strain BR302 was bred after high concentration butanol