VitC的测定.pptx

维生素C的测定 赵敏维生素C的性质是一种含有6个碳原子的酸性多羟基化合物，无色无味的片状晶体，易溶于水，不溶于脂溶性溶剂，结晶维生素C稳定，但是维生素C水溶液极易氧化，见光、热、碱、空气、氧化酶及微量铜、铁等重金属离子，可促进其氧化。生理功能：1.抗氧化作用2.作为羟化过程底物和酶的辅助因子3.改善铁、钙和叶酸的利用4.促进类固醇代谢5.清除自由基6.参与合成神经递质7.促进抗体形成，促进汞、铅、砷、苯及某些药物和细菌毒素的排出还原型维生素C和脱氢型维生素C的相互转化2H+2H+实验目的食品中的总抗坏血酸包括还原型和脱氢型两种形式，两者可以通过氧化还原反应互相转化，均具有生物活性。而在新鲜食物中坏血酸主要以还原型存在，因此测定还原型维生素C即可粗略了解维生素C的含量维生素C的测量方法：2,4 -二硝基苯肼比色法，2,6-二氯酚靛酚滴定法，高效液相色谱法等实验原理还原型抗坏血酸可将染料2,6-二氯酚靛酚还原。用标准碘酸钾溶液标定抗坏血酸溶液，然后以标定的抗坏血酸标定2,6-二氯酚靛酚染料溶液，再用此染料滴定样品中的抗坏血酸。 2,6-二氯酚靛酚在酸性溶液中呈红色，被还原后红色褪去。当被溶液过量1滴时即显红色，以示终点。在无杂质干扰时，被测溶液还原染料的量与其中所含的抗坏血酸的量成正比。实验器材材料 新鲜水果或蔬菜试剂 1%草酸溶液中，2%草酸溶液，抗坏血酸标准溶液，0.1mol/l碘酸钾标准储存液，0.001mol/L标准碘酸钾应用液，1%淀粉溶液，6%碘化钾溶液，碳酸氢钠溶液，2,6-二氯酚靛酚溶液。仪器或其他用具 天平，组织捣碎机，锥形烧瓶，微量滴定管，100ml具塞量筒，白陶土。实验操作步骤 消耗0.001mol/L碘酸钾溶液的mL数*0.088 所取抗坏血酸mL数IO3－+ 5I－+6H＋=3I2+3H2O I2 + C6H8O6 = 2HI + C6H6O6抗坏血酸标准溶液的标定 准确吸取抗坏血酸标准溶液2ml于锥形瓶中,加5ml 1%草酸溶液,6%碘化钾溶液0.5ml,1%淀粉溶液2滴，再以0.001mol/L碘酸钾标准溶液滴定至终点为淡蓝色。计算方法：抗环血酸浓度（mg/ml)=实验操作步骤 2,6-二氯酚靛酚溶液的标定 准确吸取已经标定抗坏血酸标准溶液5mL,及5ml 1%草酸溶液于锥形瓶中,用待标定的2,6-二氯酚靛酚溶液滴定至溶液呈淡红色﹙15秒内不退即为终点﹚。记录所用染料溶液的体积，计算出1ml染料溶液所能氧化抗坏血酸的量。1ml染料溶液相当于抗坏血酸的mg数=抗坏血酸浓度（mg/ml)*抗坏血酸溶液的ml数（50)滴定消耗染料的ml数实验操作步骤：样品测定 1）取新鲜水果或蔬菜50g,加入50ml 2%草酸溶液,制成匀浆 2）取10g匀浆于小烧杯中，小心地以1%草酸将样品洗入100ml容量瓶内,稀释至刻度，摇匀，静止。 3）取上层液滤过。吸取滤液5ml于锥形瓶中，以标定过的2,6-二氯酚靛酚溶液滴定至溶液呈淡红色，15s内不褪色为止。 4）用蒸馏水作空白滴定，如染料浓度过高，应适当稀释。结果计算（V1-V2)*T*100 WV1 样品滴定时所用的燃料量V2 空白滴定时所用的染料量W 滴定时所用样品稀释液中含样品的量(此次试验W为0.25）T 1mL染料相当于抗坏血酸mg数还原型抗坏血酸（mg/100g）=注意事项操作要快，还原型维生素C易被氧化，一般不超过2min.生食物匀浆在量筒内震摇可能会产生泡沫，加数滴异戊醇可除去。如样品有颜色应把样品上层液20ml倒入锥形瓶中，加入一勺白陶土，要振数次，使充分脱色。静止后再取上层液测定。同时，取一锥形瓶，加入草酸20ml,加入一勺白陶土，振摇数次，作为空白（或者加1ml氯仿，到终点时，氯仿呈淡红色）白陶土要选择脱色力强、不吸附抗坏血酸的白陶土，每批白陶土要测定回收率。样品若不易过滤，可离心取上清液测定。样品中可能有其他杂质也可能还原2，6-二氯酚靛酚，但还原染料的速度间抗坏血酸慢，所以滴定时以15s粉红色不退去为止。思考题试验过程中草酸的作用？