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- 2018-09-25 发布于江苏
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7、实验七 动物染色体标本的制备与观察
动物染色体标本的制备与观察 一、实验目的 二、实验原理 三、实验步骤 四、作业 一、实验目的 1. 掌握动物骨髓细胞染色体标本制备基本过程,了解各个操作步骤的原理。 2. 了解常用实验动物染色体的数目及特点。 二、实验原理 凡处于增殖状态的细胞,或者经过处理进入分裂的细胞即可用于染色体分析。在动物的各种组织中,骨髓是不断分裂的组织之一,是细胞遗传学研究的好材料。 进行染色体观察、分析,需要选择处于分裂中期的细胞。给动物注射一定量的秋水仙素即可使许多处于早期分裂相的细胞停滞于中期。 三、实验步骤 加完固定液后,立即用吸管将细胞轻轻吸打均匀,静置固定10min, 1500r/min离心10 min ,弃上清液。如此反复固定1次,离心10 min。 固定的细胞经离心后,吸去上层固定液,视管底细胞多寡加入1--2ml新配制的固定液,将细胞团块轻轻吸打成悬液。 ★ 在干净、湿、冷的载玻片上滴2--3滴上层细胞悬液,自然干燥(滴片)。 将玻片标本插入吉姆萨染液中,染色5 min。 用小烧杯盛蒸馏水略洗,再用吸水纸擦干玻片标本底面和四周,显微镜观察和分析。 四、作业 绘制染色体图并作简要分析。 例如:细胞密度是否适中,分裂细胞的比例如何,处于分裂中期相的细胞数量情况,染色体形态、数目、有否重叠等。 * 动物按30μg/g体重的剂量经腹腔注射秋水仙素,7—8小时后杀死蛙,取后肢股
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