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- 2018-09-21 发布于福建
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辣椒病毒诱导基因沉默接种方法优化
辣椒病毒诱导基因沉默接种方法优化
摘要:病毒诱导的基因沉默(virus-induced gene silencing,简称VIGS)技术在候选基因功能验证方面起着非常重要的作用。以辣椒八氢番茄红素脱氢酶基因(简称PDS)为目标基因,分析表达载体转化农杆菌的菌液在LB液体培养基和诱导培养基(IM)中D600 nm值的变化趋势。结果表明,当LB液体培养基中菌液D600 nm值为1.15时,后续利用IM培养菌液的效率最高,PDS基因沉默效果明显;优化了农杆菌接种方法,可为辣椒利用VIGS技术进行候选基因的功能验证提供参考。
关键词:辣椒;VIGS;农杆菌接种;基因沉默
中图分类号: Q786文献标志码: A
文章编号:1002-1302(2017)14-0082-03
病毒诱导的基因沉默(virus-induced gene silencing,简称VIGS)是通过携带靶基因的病毒侵染植株从而引起寄主植株对应的目标基因沉默,使该基因不能继续表达,进而探究基因功能的一种方式[1-2]。目前,VIGS技术已被广泛应用,棉花[3]、烟草[4]、拟南芥[5]、大麦[6]、大豆[7]等植物都已经成功构建了VIGS体系,茄科作物[8-10]也开始普遍利用VIGS技术研究基因功能。候选基因VIGS载体构建成功后,农杆菌接种侵染植株是VIGS的关键步骤,农杆菌菌液培养占据
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