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醋糟栽培对杏鲍菇胞外酶活性影响 　　摘要：以醋糟为主料栽培杏鲍菇（Pleurotus eryngii Quei），并在其生长发育的不同阶段测定了8种胞外酶的活性。结果表明，以醋糟为主料栽培杏鲍菇头潮菇生物学效率可达80.8%；其纤维素酶系完整，β-葡萄糖苷酶、HC酶、CMC酶、FP酶、淀粉酶和果胶酶的活性在子实体生长发育时期较高，在幼菇期均出现峰值；漆酶和过氧化物酶在菌丝满袋期活性出现峰值，随后呈下降趋势，过氧化物酶活性迅速下降，幼菇期和成熟期酶活性消失。 　　关键词：醋糟；杏鲍菇（Pleurotus eryngii Quei）；生物学效率；胞外酶 　　中图分类号：S646.1+9；S816.46 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2015）17-4214-03 　　DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.17.027 　　醋糟是固态发酵法酿造食醋过程中所产生的下脚料，其中含有大量的粗蛋白质、粗纤维及矿物质等成分[1]，有较高的利用价值。目前，醋糟主要用于生产饲料[2]、有机肥[3]及植物无土栽培基质[4，5]，尚不能被充分利用，迫切需要进一步挖掘其应用潜力。为提高醋糟的综合利用率，近年已有学者利用醋糟栽培食用菌做了一些研究[6]。为此，以醋糟为主料栽培杏鲍菇（Pleurotus eryngii Quei），并测定了杏鲍菇各生长期的8种胞外酶活性，以期对醋糟栽培食用菌的理论基础进行探索。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料 　　1）菌种。杏鲍菇由烟台大学应用微生物实验室提供。 　　2）试剂和材料。木聚糖、果胶、半乳糖醛酸和羧甲基纤维素钠均为Sigma公司生产，其他多为国产分析纯。醋糟为江苏镇江恒顺醋业提供，麦麸为市售。 　　3）醋糟培养基。培养基配方：醋糟78%，麦麸20%，石膏1%，蔗糖1%，料水比为1∶1.4（m∶V）。 　　1.2 方法 　　1）栽培方法。培养料按比例加水搅拌均匀后装入17 cm×33 cm的聚丙烯塑料袋，每袋折合干料400 g，121 ℃高压蒸汽灭菌1.5 h。接入原种约3 g，22 ℃恒温培养。菌丝满袋后移入温度为15～18 ℃，湿度为85%～95%的菇房开袋出菇，出菇管理按常规，试验只统计和测定了第一潮杏鲍菇的产量及胞外酶活性。 　　2）粗酶液制备方法。在杏鲍菇生长发育的不同阶段（半袋期、满袋期、原基期、幼菇期、成熟期），分别取3个菌袋，??培养物取出后，每袋多点取样2份，每份湿重7 g，然后把从3袋中取出的样品（21 g）混匀，共得2份样品。一份样品加100 mL超纯水，20 ℃浸提4 h，4层纱布过滤后，4 000 r/min离心10 min，上清液即为粗酶液；另一份样品在80 ℃恒温箱中烘至恒重，用于计算酶活力。 　　3）酶活性的测定方法。淀粉酶、果胶酶参照王玉万等[7]的方法；羧甲基纤维素酶（CMC）、滤纸纤维素酶（FP）参照Mandels等[8]的方法；β-葡萄糖苷酶、半纤维素酶（HC）、漆酶和过氧化物酶分别参照Sengupta等[9]、Shamala等[10]、潘迎捷等[11]和张志良等[12]的方法。 　　淀粉酶、CMC酶、β-葡萄糖苷酶和果胶酶的酶活力单位均为：1 U=1 mg葡萄糖/（30 min?g干培养物）。FP酶的酶活力单位为：1 U=1 mg葡萄糖/（60 min?g干培养物）。HC酶的酶活力单位为：1 U=1mg木糖/（30 min?g干培养物）。漆酶的酶活力单位为：1 g干培养物中的酶量每分钟使OD600 nm改变0.01为一个活力单位。过氧化物酶的酶活力单位为：1 g干培养物中的酶量每分钟使OD470 nm改变0.01为一个活力单位。 　　2 结果与分析 　　2.1 杏鲍菇在醋糟培养基中的菌丝生长速度及生物学效率 　　由试验数据统计分析得出，杏鲍菇在醋糟培养基中生长发育过程中菌丝生长速度为0.49 cm/d，第一潮杏鲍菇平均每袋产量为323.2 g，生物学效率达80.8%。 　　2.2 杏鲍菇在醋糟培养基中生长期间胞外CMC酶、FP酶和β-葡萄糖苷酶活性变化规律 　　从图1可以看出，在整个生长发育阶段杏鲍菇3种胞外酶活性大小为β-葡萄糖苷酶FP酶CMC酶，但它们的活性变化趋势大致相同，即在菌丝生长初期活性较低，满袋期后3种酶活性逐渐上升，同时在幼菇期出现最高酶活性峰值，随后进入成熟期的过程中酶活性显著下降。 　　2.3 杏鲍菇在醋糟培养基中生长期间胞外HC酶、淀粉酶和果胶酶活性变化规律 　　由图2显示，在菌丝生长的最初阶段，杏鲍菇淀粉酶、果胶酶和HC酶活性较低，HC酶和淀粉酶活性在菌丝满袋时期出现最低点，果胶酶活性在原基时期出现最低点，随后3种酶活性迅速增长，并同时在幼菇