dna重组技术的基本工具(讲课)-副本.pptVIP

你还记得我们吗？ 氢键 磷酸二酯键 DNA聚合酶 限制性内切酶 DNA连接酶 运载体 专题1.基因工程的基本内容 基因工程的概念： 基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做DNA重组技术或基因拼接技术。 别名： 操作环境： 原理： 操作水平： 结果： 一、限制性核酸内切酶 ——“分子手术刀” 1、简称： 2、分布： ?? 限制酶的识别特点 以中轴线双侧的DNA上碱基呈反向对称，重复排列 如：GAA TTC CCC GGG CTT AAG GGG CCC 一、限制性核酸内切酶 ——“分子手术刀” 3、特点: 　 一、限制性核酸内切酶 ——“分子手术刀” ? ④作用： ⑤结果： 工具1：限制性核酸内切酶 　 工具3：运载体 1、需要的条件 　⑴有1~多个限制酶切点 　⑵能在受体细胞中自我复制，或整合到受体细胞的 染色体DNA上复制 　⑶有某些标记基因，便于筛选 ⑷对受体细胞无害 2、常用运载体 　 质粒、λ噬菌体的衍生物或某些动植物病毒 3、质粒　 2和7能连接形成…ACGT… ????????????? …TGCA…； 4和8能连接形成…GAATTC… ???????????? …CTTAAG…； 3和6能连接形成…GCGC… ???????????? …CGCG…； 1和5能连接形成…CTGCAG… ???????????? …GACGTC…。 1、在基因工程中，切割运载体和含有目的基因的DNA片段，需使用（ ） 同种限制酶 B. 两种限制酶 同种连接酶 D. 两种连接酶 4) DNA体外重组的实现 1、载体必须具备的条件： ①能够在宿主细胞中复制并稳定地保存； ②具有一至多个限制酶切点，以便与 外源基因连接 ③具有某些标记基因，便于进行筛选。 ④对受体细胞无害 三、基因进入受体细胞的载体 ——“分子运输车” 2、常用的载体： 质粒（最常用） λ噬菌体的衍生物， 动植物病毒等 能复制并带着插入的目的基因一起复制 有切割位点 有标记基因 3、质粒 本质：小型环状DNA分子。 分布：许多细菌、 酵母菌等生物 3、天然的DNA分子可以直接用做基因工程载体吗？为什么？ 不可以，作为基因工程使用的载体必需满足一定条件,且都要进行人工改造后才能用于基因工程操作。 思考与探究 P7 教材P7思考与探究 1 反馈练习： 2、不属于质粒被选为基因运载体的理由是 A、能复制 （ ） B、有多个限制酶切点 C、具有标记基因 D、它是环状DNA D 3、下列不适合用于基因工程的运载体 是（ ） A、质粒 B、噬菌体 C、细菌 D、病毒 选我 C 4、下列说法正确的是：（ ） A、限制酶的切口一定是GAATTC碱基序列 B、质粒是基因工程中唯一的运载体 C、重组技术所用的工具酶是限制酶、 连接酶、运载体 D、利用运载体在宿主细胞内对目的基因 进行大量复制的过程可称为“克隆” 选我 D 审题 5、以下是两种限制酶切割后形成的DNA片段，试分析： ①GC… ②AATTC… ③ …GC ④ …CTTAA CG… G… …CG …G (1)其中①和 是由一种限制酶切割形成的 末端，两者要重组成一个DNA 分子，所用DNA连接酶通常是 。 （2） 和 是由另一种限制酶切割形成的 末端，两者要形