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虎红平板凝集实验操作规程.doc
PAGE \* MERGEFORMAT 287
科室：检验科
题目：虎红平板凝集试验
操作规程
页码：共2页
编号：JYK-JR-87
生效日期：
2017.06.01
目的
为了规范血中虎红平板凝集试验。
适用范围
用于测定正常人和接触布氏杆菌作业人员及病人。
原理
试验原理：虎红平板凝集试验又称为班氏孟加拉红平板凝集试验。由于所用的抗原是酸性（PH3.6-3.9）带色的抗原，该抗原与被检血清作用时能抑制血清中的IgM类抗体的凝集活性、检查的抗体是IgG类，因此提高了反应的特异性。
虎红平板凝集试验具体方法如下：
4、材料准备
（1）、虎红平板凝集抗原、标准阳性血清、阴性血清由制标单位提供，按说明书使用。
（2）、被检血清应新鲜，无明显蛋白凝块，无溶血和无腐败气味。
（3）、洁净的玻片或玻璃板，其上划分成4cm2的方格。
（4）、或移液器，适于滴加0.03mL液体。
（5）、混合棒或火柴杆，供搅拌用。
5、操作方法
(1)、实验前，应将血清和抗原在室温放置30-60min。
(2)、将玻璃板上各格标记被检血清号，然后加相应被检血清0.03mL。
(3)、在被检血清旁滴加虎红平板凝集抗原0.03mL。
(4)、用牙签类小棒搅动血清和抗原，使之充分混合，在5分钟内观察结果。
(5)、每次试验应设阴性血清、阳性血清对照。
6、结果判定
(1)、在阴、阳性血清对照成立的条件下，方可对被检血清进行判定。
(2)、受检血清在4min内出现肉眼可见凝集现象者判为阳性(+)，无凝集现象，呈均匀粉红色者判为阴性(-)。
7、方法评价
（1）、虎红平板凝集试验检测布鲁氏菌病，方法简便、快速、容易操作，适于基层大面积检疫；
（2）、该方法敏感性较好，检查牛的阳性率稍高于绵羊、山羊。
（3）、因为在酸性环境下IgM活性受抑，该法主要是检查IgG类凝集抗体，所以特异性较好，与补体结合试验、二巯基乙醇（2-ME）试验和抗球蛋白试验有较高的吻合率。
（4）、该法受制备抗原时条件影响较大，所以每批制备抗原应予以检查、标化方可应用。
日期
编写人
操作人
负责人
批准人
2017.06.01
王跃武
张国慧
王跃武
孙立华
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