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微生物学 第七章 微生物的生长及其控制 2016-11-23;一个微生物细胞;微生物通过新陈代谢把营养物质转变成细胞物质，增加个体重量的过程。 ;单细胞微生物，生长导致细胞数量增加（细胞个体增长到一定程度就分裂成两个大小基本相等的子代细胞）。;第一节 个体细胞生长繁殖概述;杆菌在生长过程中，新合成的肽聚糖是在多个位点插入到老细胞壁中，新老细胞壁呈间隔分布。;3、细菌的分裂 ;二、霉菌菌丝的延伸过程 ;第二节 微生物的群体生长;典型生长曲线根据微生物的生长速率常数R（即每小时的分裂次数）的不同，一般可分为迟缓期（延滞期）、指数期、稳定期和衰亡期等四个时期。;;迟滞期出现的原因：;2. 指数期（Exponential phase），又称对数期（Log phase);微生物研究中常用的三个参数;生长速度常数（R）每小时的分裂次数 n ㏒ x2 - ㏒ x1 R = = t2 – t1 t2 – t1 代时(G) 1 t2 – t1 G = = R 3.322(㏒ x2 - ㏒ x1) ;;例如：一培养液中微生物数目由开始的12，000（ B ），经4h （ t ）后增加到49，000，000（ b ）， 这样， n ＝ (lg4.9×107－lg1.2×104）÷0.301＝12;★代时能够反应细菌的生长速率，代时短，生长速率快，代时长，生长速率慢。在很多微生物学研究中常常要了解微生物的代时。 ★代时在不同种微生物中的变化很大，多数微生物的代时为1~3h,然而有些快速生长的微生物的代时还不到10min,而另一些微生物的代时却可长达几小时或几天；另外，同一种微生物，在不同的生长条件下其代时的长短也不同；但是，在一定条件下，每一种微生物的代时是恒定的，因此它是微生物菌种的一个重要特征。;纳米细菌(nanobacteria)，三天才分裂一次； 地下数公里发现的超微型细菌，用代谢产生的CO2作指标，计算出这些超微菌的代谢速率仅为地上正常细菌的10-15，有人认为它们需要100年才能分裂一次。 ;影响代时的因素：;指数期细胞的应用：;3.稳定期（Stationary phase） ;①稳定期如果及时采取措施，补充营养物质或取走代谢产物或改善培养条件（调整pH、温度、通气），可以获得更多的菌体物质或代谢产物。 ②对以收获菌体或与菌体生长相平行的代谢产物（SCP、乳酸等）为目的的发酵生产来说，稳定期是产物的最佳收获期。 ③通过对稳定期到来原因的研究，促使了连续培养原理的提出和工艺、技术的创建。 ;4. 衰亡期（Decline或Death phase）;在实际工作中多采用分光光度计测定OD值的方法绘制细菌的生长曲线，但该法绘制的生长曲线不能反映衰亡期;二. 丝状真菌的生长曲线;三、同步生长（Synchronous growth）;1. 机械筛选法;2. 环境条件控制法;四、连续培养(Continous culture）;当微生物在单批培养方式下生长达到对数期后期时，一方面以一定的速度流进新鲜培养基并搅拌，另一方面以溢流方式流出培养液，使培养物达到动态平衡，其中的微生物就能长期保持对数期的平衡生长状态和稳定的生长速率。;最简单的连续培养装置包括：培养室、无菌培养基储存器和调节流速的控制系统。 ;1. 连续培养的类型;两种连续培养系统的比较;如果根据连续培养器串联的数目分，也可分为两种类型：;连续培养应用与生产就称为连续发酵。;第三节 微生物生长的测定;一、计数法;其它直接计数方法：;2. 间接计数法;样品充分混匀；;一个菌落可能是多个细胞一起形成，所以在科研中一般用菌落形成单位（colony forming units， CFU）来表示，而不是直接表示为细胞数。;3. 膜过滤培养法;4. 比浊法;二、质量法;三、 生理指标法;第四节 环境对微生物生长的影响;温度是影响微生物生长的最重要因素之一。 温度对微生物的影响具体表现在： 影响酶活性，温度变化影响酶促反应速率，最终影响细胞合成。 影响细胞膜的流动性，温度高，流动性大，有利于物质的运输，温度低，流动性降低，不利于物质运输，因此，温度变化影响营养物质的吸收与代谢产物的分泌。 影响物质的溶解度，对生长有影响