筛选几丁质分解酶生产菌与其酵素之特性分析Screeningof-大叶大学.PDF

科學與工程技術期刊 第三卷 第三期 民國九十六年 25 Journal of Science and Engineering Technology, Vol. 3, No. 3, pp. 25-34 (2007) 篩選幾丁質分解酶生產菌與其酵素之特性分析 1 1 1 2 1 馬玟釧 連德昇 吳淑姿 余世宗 凃瑞澤 1 大葉大學生物產業科技學系 2 大葉大學環境工程學系 515-91彰化縣大村鄉山腳路 112號 摘 要 本研究自台北虎山溪之土壤中，篩選出具有生產幾丁質分解酶（chitinase ）之菌株，此菌 株為革蘭氏陰性桿菌，經食品工業研究所鑑定為 Aeromonas hydrophila ，命名為Aeromonas hydrophila DYU-Too10 。此菌株於CB （chitin broth ）培養基中，振盪培養 120 h ，幾丁質分解酶 活性可達 316 U/L ，其水解產物主要以N- 乙醯葡萄糖胺（N-acetylglucosamine ）為主。分析粗酵 素特性，發現此酵素於酸性環境中易喪失活性，對熱敏感，其最適反應溫度為 40 °C ，最適反應 之 pH 為 7.0 。以不同碳源培養此菌株，得知以2% （w/v ）粉狀幾丁質作為碳源之酵素產量為最 高，而利用其他醣類作為碳源時，菌株則無法大量分泌幾丁質分解酶，推測其所分泌之幾丁質 分解酶是由幾丁質誘導產生的。將粗酵素液經硫酸銨沉澱、透析、DEAE-Sepharose CL-6B 及 Sephadex G-100 純化後，可獲得具有幾丁質分解酶活性之蛋白質。經活性電泳染色法證實，有 三種幾丁質分解酶存在，其分子量分別為 40 、50 及 55 kDa 。 關鍵詞 ：幾丁質，幾丁質分解酶，N- 乙醯葡萄糖胺 Screening of a Chitinase-Producing Strain and Characterization of Its Chitinases 1 1 1 2 1 WEN-CHUAN MA , TE-SHENG LIEN , SHWU-TZY WU , SHIH-TSUNG YU and JUI-RZE TOO 1Department of Bioindustry Technology, Da-Yeh University 2Department of Environmental Engineering, Da-Yeh University No