利用花药培养快速选育广亲与水稻材料.docVIP

利用花药培养快速选育广亲与水稻材料 　　摘要：以籼粳交品种甬优4949为材料进行花药培养，建立了籼粳交DH群体，并对丰产性较好的DH系进行广亲和基因S5n的PCR检测，获得了含有广亲和基因S5n的DH系材料。 　　关键词：水稻（Oryza sativa L.）；花药培养；籼粳交；广亲和 　　中图分类号：S511 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2017）17-3213-03 　　DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2017.17.004 　　Rapid Breeding of Wide Compatibility Rice Materials by Anther Culture 　　ZHA Zhong-ping， DU Xue-shu， WAN Bing-liang， YIN De-suo， LI Jin-bo， XIA Ming-yuan， QI Hua-xiong 　　（Food Crops Institute， Hubei Academy of Agricultural Sciences/Hubei Key Laboratory of Food Crop Germplasm and Genetic Improvement， Wuhan 430064， China） 　　Abstract： DH population was got by anther culture from Yongyou 4949， which is a indica-japonica hybrid rice. The wide compatibility gene S5n were detected by PCR in the DH lines with high yield potential and the DH lines with wide compatibility gene S5n were obtained. 　　Key words： rice （Oryza sativa L.）； anther culture； indica-japonica hybrid； wide compatibility 　　水稻（Oryza sativa L.）是世界上重要的?Z食作物之一，在其长期的栽培驯化过程中形成了籼、粳2个亚种[1-5]，亚种间的杂种一代具有强大的杂种优势，水稻籼、粳亚种间杂种优势的利用是进一步提高水稻单产的重要途径之一。但籼、粳亚种间杂种一般结实率偏低、子粒充实度差，这些问题制约了亚种间杂交稻的利用[6]。水稻广亲和基因S5n可克服籼粳生殖障碍，与籼稻或粳稻亚种杂交能产生正常可育的后代[7]。培育和利用广亲和水稻品种是促进水稻籼粳杂种优势、进一步提高水稻产量的当务之急。但已知的广亲和品种多为农艺性状欠佳的农家品种，不能直接作为亲本使用；而常规育种方法选育优良性状的广亲和品种需要杂交、回交、转育，耗时冗长，育种周期长。近年来育种家们育成了甬优12、浙优18、春优84[8-11]等一批综合性状优良的籼粳亚种间组合，为进一步利用籼粳间杂种优势奠定了良好的基础。 　　水稻花药培养可以快速获得纯系、提高选择效率、有效缩短育种周期。试验以目前生产上优良的籼粳组合甬优4949为材料，利用水稻花药培养方法获得纯合DH（双单倍体）系，并对DH系进行广亲和基因S5n的PCR检测，为快速选育广亲和水稻材料提供了一条有效途径。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料 　　甬优4949是由宁波市种子有限公司和武汉佳禾生物科技有限责任公司培育的三系籼粳杂交中稻品种。2015年通过湖北省农作物品种审定委员会审定。本试验所用甬优4949由武汉佳禾生物科技有限责任公司提供。 　　1.2 方法 　　1.2.1 水稻材料种植 2015年春季在武汉分期播种，大田移栽，以获得足够发育时期适宜的花药。具体分期播种和移栽时间见表1。 　　1.2.2 花药取材 2015年7月起，分期播种的甬优4949依次进入孕穗期。于晴天的下午取单核靠边期的幼穗，为保证幼穗新鲜，取样时幼穗留2节及2～3片叶片，放在盛有清水的桶中。取好的幼穗在室内显微镜下观察花粉母细胞发育时期。 　　1.2.3 预处理 田间取回的幼穗在实验室里重新修剪，保留幼穗2叶1节，75%乙醇表面消毒后，用保鲜膜包好幼穗，放在4 ℃冰箱中预处理7～10 d。 　　1.2.4 诱导培养 预处理结束后，剥去多余叶片和叶鞘，留取发育适宜的带枝小穗，装入无菌烧杯中，先用75%乙醇表面消毒30 s，再用0.1% HgCl2溶液浸泡10 min左右，无菌水冲洗3～4次，每次1 min，最后用无菌滤纸吸干小穗水分。在超净工作台上用剪颖抖药法将花药接种至诱