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碳水化合物的测定;淀粉的测定;1、淀粉的测定;;淀粉的主要性质如下:
① 水溶性:直链淀粉不溶于冷水,可溶于热水,支链淀粉常压下不溶于水。只有在加热并加压时才能溶解于水。
② 醇溶性:不溶于浓度在30%以上的乙醇溶液。
③ 水解性:在酸或酶的作用下可以水解,最终产物是葡萄糖。
④ 旋光性:淀粉水溶液具有右旋性
⑤ 与碘有呈色反应(是碘量法的专属指示剂); 淀粉的测定方法有多种,部是根据淀粉的理化性质而建立的。常用的方法有:
酶水解法
酸水解法
其他方法(碘-淀粉比色法)
;1.1酶水解法 (GB/T 5009.10—2008)
(1)原理
样品经乙醚除去脂肪,乙醇除去可溶性糖类后,在淀粉酶的作用下,使淀粉水解为麦芽糖和低分子糊精,再用盐酸进一步水解淀粉为葡萄糖,按还原糖测定法测定还原糖含量,再换算为淀粉含量。
(2)适用范围及特点
淀粉含量较高的食物。酶有严格的选择性,不受其它多糖的干扰,结果准确可靠,但操作复杂费时。;;(3)试剂
?高峰式淀粉酶(酶活力≧1.6U/mg)
?石油醚
?甲基红指示液(2g/L)
④盐酸(1+1)
⑤氢氧化钠溶液(200g/L)
⑥碱性酒石酸铜甲液
⑦碱性酒石酸铜乙液
⑧葡萄糖标准溶液
⑨淀粉酶溶液(5g/L)
⑩碘溶液
11.85%乙醇
;;;;;1.2 酸水解法
(1)原理:
样品经乙醚除去脂肪,乙醇除去可溶性糖类后,用盐酸水解淀粉为葡萄糖,按还原糖测定法测定还原糖含量,再换算为淀粉含量。
(2)适用范围及特点
适用于淀粉含量较高,而半纤维素和多缩戊糖等其它多糖含量较少的样品。富含半纤维素和多缩戊糖的样品,水解时分解为木糖、阿拉伯糖等还原糖,使测定结果偏高。;(3)试剂
?氢氧化钠溶液(400g/L)
?乙酸铅溶液(200g/L)
?硫酸钠溶液(100g/L)
其余试剂同酶水解法测定淀粉(GB/T 5009.10—2008)
(4)测定方法
?试样处理
?水解
100ml水洗涤脱脂、去可溶性糖的残渣于250ml锥形瓶中→加入30ml盐酸→装上冷凝管→沸水浴中回流2h→冷水迅速冷却→2滴甲基红指示液、NaOH调至黄色→盐酸调到刚好变为红色→精密pH试纸测试使pH=7→加20ml2醋酸铅摇匀放置10min→加20ml硫酸钠液→用水转移至500ml容量瓶中定容→过滤,弃初滤液,剩余备用。
; ?测定
同酶水解法测定淀粉(GB/T 5009.10—2008)
试样中淀粉的含量,按以下公式计算
X= (A1-A2)*0.9/ m*V/500*1000 × 100
式中:
X——试样中淀粉的含量,g/100g;
A1——测定用试样中葡萄糖的质量,mg;
A2——空白中葡萄糖的质量,mg;
0.9——以葡萄糖计换算成淀粉的换算系数;
500——试样液总体积,mL;
m——称取试样的质量,g。
;1.3碘-淀粉比色法;;;;2、纤维的测定;;2.1粗纤维(crude fiber)的测定(重量法)
(1)原理
热的稀硫酸作用下,样品中的糖、淀粉、果胶等物质经水解除去,再用热的氢氧化钾处理,使蛋白质溶解、脂肪皂化而除去,用乙醇和乙醚处理除去单宁、色素等所得残渣即为粗纤维,如其中含有无机物质,可经灰化后扣除。;(2)适用范围及特点
该法操作简便、迅速、适用于各类食品,是应用最广泛的经典方法。
(3)试剂
1.25%硫酸,1.25%氢氧化钾溶液。
(4)测定方法
样品处理(干燥样品、含水样品)→酸处理→碱处理→干燥→灰化→结果计算。;;DYD-06型粗纤维测定仪; 2.2不溶性膳食纤维的测定;(2)适用范围及特点
本法适用于谷物及其制品、饲料、???蔬等样品,① 对于蛋白质、淀粉含量高的样品,易形成大量泡沫.粘度大,过滤困难,使此法应用受到限制。② 不包括水溶性非消化性多糖,这是此法的最大缺点。
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