玛丽安万年青茎段培养中内源菌污染防止研究.pptVIP

1.4.7 不同利福平和氯霉素浓度组合的筛选 以50mg.L-1利福平作对照，设计25mg.L-1利福平+25mg.L-1氯霉素、25mg.L-1利福平+50mg.L-1氯霉素、50mg.L-1利福平+25mg.L-1氯霉素和50mg.L-1利福平+50mg.L-1氯霉素4种组合，进行最佳浓度组合筛选。 1.5 培养条件与统计 培养室温度25-28℃，光照2000-4000lx，每天光照12-14h，20d后观察统计。数据采用SPSS10.0软件分析处理。 过滤灭菌 2 结果与分析 2.1 玛丽安万年青茎段培养中内源菌污染症状 经过严格的常规消毒，玛丽安万年青茎段初代培养中仍然存在严重的污染。有些污染并不形成明显的菌落，而只在培养基内部形成“丝状物”或“晕状物”，不容易被肉眼察觉，如不仔细观察很容易被忽视，只在背光检查时才易被发现，随着培养天数的增加，菌量逐渐累积，才在培养基上显现出来，见图6。 A B 图6 玛丽安万年青茎段培养中内源菌污染症状（A丝状，B晕圈状） 2.2 外植体的预处理对玛丽安万年青茎段培养污染防止的效果 采用ANB1和ANB2处理材料所取得的效果较好，未污染率和成活率都比较高，都达到50%以上。其中ANB2的未污染率达到76.7%、成活率为50.0%（表1），说明ANB2这种抗生素能比较有效地抑制外植体内源细菌的污染。 表1 不同抗生素预