有机酸发酵2课件.ppt

第二章 有机酸发酵;2.乳酸——聚乳酸牵头发展 具有广泛用途的有机酸。世界乳酸的总产量约为20万吨左右，日本和美国两国的乳酸需求量3.5万吨。我国的乳酸目前已形成了约4万吨的生产能力。 青岛扶桑化学公司是国内最大的精制(发酵)乳酸出口企业。 PLA为一种无毒高分子新材料，在环境中可自动降解，可用于生产医用塑料制品和食品包装等。产业界认定为新世纪最有发展前途的新型材料。由于我国原料玉米丰富，发展乳酸及聚乳酸产业的前景广阔。目前，乳酸生产成本偏高以及聚乳酸聚合难题成为制约乳酸工业发展的瓶颈。 发酵法生产的乳酸有L－乳酸和D－乳酸。我国用德氏杆菌厌氧发酵生产的乳酸96％为D型，L型只有4％。化学合成法生产的乳酸D型和L型个50％。称DL乳酸。;3、苹果酸——生产成本较高 苹果酸在饮料中使用较多。但由于价格较贵，故苹果酸的用途受到了一定的限制。全球苹果酸的年产销量约在3万吨左右。苹果酸有清除牙齿色斑和牙垢(牙石)的美容作用。故日本花王等日化产品厂商均已在牙膏、牙粉等洁齿产品中添加苹果酸。而L苹果酸可用于医药工业的输液、pH调节剂和某些药物的中间体，因而价格昂贵。每吨纯品65－70万元人民币。生产成本高,出口数量少。我国采用固定化菌体将富马酸转化为L苹果酸，因技术不过关，富马酸残留高，出口困难。而发酵法生产L－苹果酸仍处于研究阶段。;4、葡糖酸——有保健新用途 葡糖酸是惟一具有促进双歧杆菌等“益生菌”生长作用的有机酸。蜂蜜、酿造醋等产品均含有一定量的天然葡糖酸。酸味为柠檬酸的1/3。葡糖酸作为食品和医药原料(如用于生产“葡糖酸钙)的用量正在逐年上升。全球葡糖酸的产销量约在2万吨左右，其中90%用于食品加工(如作为豆腐凝固剂)，用于医药的仅占1成。主要产品葡萄糖酸、葡萄糖酸钙、葡萄糖酸δ－内酯。;5、酒石酸——八成产自欧洲 主要来源是葡萄酒生产厂。酒石酸在食品工业中应用远远不如柠檬酸那样广泛，但它却是医药工业的重要原料。许多难溶药物均可加工成为水溶性极佳的酒石酸盐(如经典药物“酒石酸锑钾”)。欧洲各大葡萄酒厂是世界最大的酒石酸生产基地，全球80%的酒石酸产自??洲 。发酵法生产酒石酸仍在研究中;7、衣康酸 重要的化工原料，主要用于晴纶化纤、树脂、橡胶、涂料、造纸、制药、农药、轻工、食品等领域。世界年需衣康酸5－6万吨。主要生产国美国、日本、俄罗斯。我国以发酵法生产衣康酸，年产量5000t。大部分内销。因技术存在问题，产品质量不过关。外销困难。;第二节 柠檬酸发酵;一、柠檬酸发酵机制 1、柠檬酸的生物合成途径 要点： 按照正常的菌体的代谢规律，上述途径并不能够积累柠檬酸，而是进入TCA循环，被彻底氧化。 菌体内在因素：，顺乌头酸酶、异柠檬酸脱氢酶酶的活性丧失或非常微弱。;TCA循环及DCA循环;2、黑曲霉柠檬酸发酵代谢调控;2、黑曲霉柠檬酸发酵代谢调控;2、黑曲霉柠檬酸发酵代谢调控;＋ 激活 － 抑制;1—磷酸果糖激酶 2—丙酮酸脱氢酶 3—柠檬酸合成酶 4—乌头酸水合酶 5—异柠檬酸脱氢酶 6—?-酮戊二酸脱氢酶 7—琥珀酸脱氢酶 8—富马酸酶 9—苹果酸脱氢酶 10—草酰乙酸水解酶; 积累柠檬酸的必要条件;⑴严格限制供给Mn2+等金属离子，或筛选耐高浓度锰离子、锌离子、铁离子，降低菌体中糖代谢转向合成蛋白质、脂肪、核酸的能力，使细胞中形成高水平的NH4+ ，解除柠檬酸和ATP对PFK的抑制；促进了EMP途径代谢流增大； ⑵存在一条活性活动性强的侧系呼吸链，对氧敏感，但不产生ATP，是细胞内ATP浓度下降，减轻了ATP对PFK的抑制作用，促进EMP途径的畅通，增加柠檬酸的生物合成。 ⑶丙酮酸羧化酶是组成型酶，不受代谢调节控制，可源源不断提供草酰乙酸；丙酮酸氧化脱羧生成乙酰辅酶A和CO2固定反应取平衡，保证乙酰辅酶A和草酰乙酸的提供，柠檬酸合成酶不受调节，增强了柠檬酸的合成能力。; （4）α-酮戊二酸脱氢酶受葡萄糖和铵离子阻遏，减弱了TCA循环，降低细胞内ATP浓度，并使?-酮戊二酸脱氢酶浓度升高，又反馈抑制异柠檬酸脱氢酶，降低柠檬酸的自身分解。 （5）顺乌头酸水合酶催化时建立柠檬酸：顺乌头酸：异柠檬酸=90：3：7的平衡，顺乌头酸水合酶的作用总是趋向合成柠檬酸，一旦柠檬酸的浓度升高到某一水平，就抑制异柠檬酸脱氢酶活性，从而进一步促进柠檬酸自身积累，pH降至2.0一下，顺乌头酸水合酶和异柠檬酸脱氢酶活性失活，更有利于柠檬酸积累并排除体外。;3、柠檬酸发酵的产率 （1）无CO2固定反应的产率：192 /( 180*1.5) == 71.1% 合成一分子柠檬酸需要3分子的CH3CO-CoA，也就是需要1.5分子的葡萄糖； （2）通过 CO2固定反应提供C4二羧酸 提供草酰乙酸的两个系统（CO2固定系统）： Ⅰ