干扰素制备的工艺流程1课件.pptVIP

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2018-10-15 发布于江苏
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干扰素制备的工艺流程1课件.ppt

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基因工程药物的制造实例什么是干扰素？概念(interferon,IFN)：机体免疫细胞产生的一类细胞因子，是机体受到病毒感染时，免疫细胞通过抗病毒应答反应而产生的一组结构类似、功能接近的生物调节蛋白。干扰素的作用？一、抗增生作用：这是干扰素能用于治疗多种肿瘤的原因。二、抗病毒作用：当我们的机体感染病毒时，体内会产生大量的干扰素。三、免疫调节作用四、抗纤维化作用五、干扰素还有抗新血管增生、促进细胞凋亡等多种功能干扰素是目前最主要的抗病毒感染和抗肿瘤生物制品。 · 1、干扰素cDNA的获得产生干扰素的白细胞全RNA 5%~23%蔗糖密度梯度离心提取12 S mRNA 12S mRNA 什么叫12 S mRNA？反转录成cDNA 寡dT—纤维柱 mRNA 接目的cDNA 产检增转切干扰素 2、基因工程菌的组建 pBR322质粒抗性筛选？大肠杆菌K12 用已知干扰素DNA片段作为探针挑选 Tcr Apr Tcr Tcr 受体菌的抗性筛选 ?步骤一：将细菌涂布到含四环素的培养基上培养，就可得到质粒PBR322或重组质粒的细菌单菌落。??????????? 步骤二：若想进一步筛选出重组子，可采用负选择（详情请看《基因工程》P59）。但由于生产中要用已知干扰素DNA片段作为探针挑选富有干扰素的cDNA克隆，所以不需要进行负选择。二、基因工程干扰素的制备制备基因工程ɑ-干扰素工艺流程如下： (P73) 启开种子制备种子液精提粗提发酵培养半成品制备半成品检定分装冻干成品检定成品包装制备的过程及要求：（1）发酵（2）产物提取纯化（3）质量控制标准和要求（P74） * *