苦参碱对人类HT29结肠癌细胞的抗肿瘤作用及其机制课件.pptVIP

苦参碱对人类结肠癌细胞HT29增殖的影响和它的抗肿瘤机制 汇报人：王祺茹 * Contents 1 细胞培养 2 MTT实验 3 细胞周期分析 4 细胞凋亡评估 5 细胞色素C从线粒体向细胞质释放的检测 6 苦参碱对细胞蛋白质表达的影响 7 统计分析 * 细胞培养 细胞：人类结肠癌HT29细胞系 培养基： RPMI-1640培养基 CC?108微型血球计数器确定细胞数量 * MTT实验 反映了细胞线粒体的正常功能和细胞的存活率 苦参碱对细胞增殖抑制率计算方法： 1-（给药组孔中的平均OD值/对照组孔中的平均OD值）*100 * 苦参碱对HT29细胞生长具有抑制作用 图1.不同剂量苦参碱孵育不同时间 对细胞的增殖抑制率 * 苦参碱诱导G0/G1 细胞周期阻滞 图2.细胞周期不同时相PI染色细胞DNA的荧光分布频率曲线图 细胞凋亡评估 检测方法：Annexin?V?FITC/PI双染色法 分析仪器：流式细胞仪 * * 苦参碱能够诱导细胞凋亡 图3.流式细胞仪分析不同浓度苦参碱用两种荧光染料染色的细胞数量 FL1-H, Annexin V-FITC; FL2-H, PI. 细胞色素C从线粒体向细胞质释放和半胱天冬酶-3和半胱天冬酶-9的活化的检测 * 线粒体 细胞质 细胞色素C 促凋亡蛋白激活因子 凋亡小体 半胱天冬酶-3,-9 细胞凋亡级