探讨肠道微生态(厌氧菌为主)研究技术的应用情况.doc

探讨肠道微生态（厌氧菌为主）研究技术的应用情况 在人体的肠道内栖息着大约1014个约400~500种细菌，是人体细胞总数的10-20倍。肠道内的细菌对人体肠道的生长发育、免疫功能、消化吸收等功能起着重要的作用。为了更好的研究肠道正常菌群的功能以及与机体的相互关系，对肠道内细菌的分离、鉴定和定量非常重要。到目前为止，人们对肠道正常菌群的了解是通过对粪便标本选择性培养计数菌落数而获得的。随着分子生物学的发展以及分子生物学技术在微生态领域的应用，人们对微生态学的研究取得了突破性的进展。国外已经开展这方面的研究，国内在这方面起步较晚，且研究缺乏整体性和连续性。往往只研究其中的某一方面，一旦完成了，就没有继续下去。 目前对健康人的大便标本的研究中已知肠道内栖息着大约1014个细菌，是人体细胞总数的10~20倍，约400~500种。其中90%~99.9％是厌氧菌，肠杆菌、肠球菌等需氧菌仅占菌群极少的一部分。在这些细菌中主要包括类杆菌属、真杆菌属、双歧杆菌属、乳酸杆菌属等至少14个菌属。大量的研究结果表明，肠道内的细菌对人体的生长发育、免疫功能、营养、发病机制、健康等起着重要的作用。肠道内细菌的分离、鉴定和定量对于研究肠道内菌群的功能以及与机体的相互关系非常重要，同时它能提供结肠细菌代谢潜能的一个重要指标。 虽然对这个方面不太了解，可还是要积极参与一下：微生态制剂在国外研究得比较早，在国内的话也有以前的三株口服液，以及常见的双歧杆菌和乳酸杆菌等相关产品；目前研究发现微生态与人类健康和寿命也有密切的关系，它的机理是微生态菌能分解和减少肠道中的有害物质，如胺、吲哚、硫化氢、亚硝酸盐等，这些物质是诱发大肠癌，引发人体衰老、患病的重要致病内因。 在肠道微生态（厌氧菌为主）研究应用比较多的技术包括16Sr RNA/rDNA序列分析技术，我查到一篇文章与大家一起分享，也希望我们的讨论能够起到泼砖引玉的作用，欢迎大家继续探讨！ 16Sr RNArDNA序列分析技术在瘤胃细菌微生态系统研究中的应用.caj (103.85k) 我也插两句 微生物多样性中相当部分当属于厌氧菌的多样性，由于培养相对困难，厌氧菌的研究要远落后于好氧菌，分子生物学的手段也基本限于厌氧菌的检测，分类鉴定等，而真正利用基因工程技术改造厌氧菌的研究很少。近来有利用改造厌氧菌来提高纤维素降解的，在医学上也有采用厌氧菌为载体进行肿瘤治疗的报道。事实上，在自然界中大量难降解物质都可以由厌氧菌降解，特别是在一些极端环境中（比如油井中的石油微生物）。 我比较看好以微生物多样性为理论基础的，以构建环境微生物DNA文库为平台，筛选获得新酶，新活性物质的研究。 1、 微生物重量分布　　人体表面及与外界相通的腔道常栖居着种类繁多、数量庞大的微生物。一个健康人由1013个动物细胞组成，而定植的原核细胞达1014个，人体自身细胞只占栖居在体表和体内微生物细胞的10%。按重量计算：人体携带的微生物总重量约为1271g，其中肠道占1000g，肺：20g，口腔占20g，鼻占10g，眼1g，阴道29g，皮肤200g。人体携带的微生物细胞主要在肠道，胃肠的微生物量占人体总微生物量的78.67%，粪便重要的1/3～2/5是微生物。人体微生物总量相当于一个肝脏大小，产生的酶多于肝脏产生的酶量。 2、 厌氧菌主要菌属在体分布的情况如下： 肠道菌群中各类细菌构成：在正常微生物群中，对许多高等动物和人类来说，厌氧菌占优势，其中在人的肠道内专性厌氧菌占总数的99%左右。专性厌氧菌：1011-12CFu/g肠内容兼性厌氧菌：≤108CFu/g肠内容真菌：≤103CFu/g肠内容部 位 主要微生物皮肤 表皮葡萄球菌、棒状杆菌、大肠埃希氏杆菌、痤疮丙酸杆菌等。 口腔及上呼吸道 葡萄球菌、卡他莫拉氏菌和链球菌、大肠埃希氏菌、嗜血杆菌、棒状杆菌、假丝酵母菌、梭形杆菌、类杆菌、消化链球菌、乳杆菌等。其中厌氧菌比需氧菌多肠道(空肠末段、回肠、结肠) 肠杆菌科细菌、假单胞菌、肠球菌、葡萄球菌、酵母菌、各种专性厌氧菌(双岐杆菌、类杆菌、真杆菌、消化(链)球菌、产气荚膜梭菌等)占绝大多数；还有腺病毒、埃可病毒等泌尿道 表皮 葡萄球菌、棒状杆菌、肠球菌、大肠埃希氏菌、类杆菌等阴道 乳杆菌、棒状杆菌、大肠埃希氏菌、肠球菌、类杆菌、厌氧球菌、假经酵母菌、支原体。 微生态学家将肠道的细菌大致分为有益菌与有害菌二大部分，并对它们的作用作了一些研究。目前已明确双歧杆菌、乳杆菌是人体的有益生理菌。对它们的一些作用如生物拮抗(定植抗力)、免疫等方面做了较为深入的研究。(1)定植抗力作用。所谓定植抗力即包括双歧杆菌在内的内源性专性厌氧菌群限制肠道中潜在致病菌(外籍菌)数量的能力，也就是对潜在致病菌在肠道定植的阻抗力。起定植抗力作用的是内源性专性厌氧菌即原籍菌。定植抗力