花色苷分离鉴定方法及其生物活性.PDFVIP

花色苷分离鉴定方法及其生物活性 徐渊金 杜琪珍 (浙江工商大学食品与生物工程研究所，杭州，310035) 摘 要 系统介绍了花色苷类物质的薄层色谱、柱色谱、高效液相色谱、高速逆流色谱分离，色谱、光谱、质谱、核 磁共振波谱鉴定及抗氧化、抗癌和抗癌变等生物活性。 关键词 花色苷，生物活性，抗氧化，抗突变，抗癌 花色苷是类黄酮——以黄酮核为基础的一类物 行鉴定，只有将各组分进行分离提纯为单体花色苷 质中能呈现红色的一类化合物，广泛存在于植物的 后，才能进行鉴定，确定其化学结构。目前较常用的 花、果实、茎、叶和根器官的细胞液中，使其呈现由红、 提取方法是溶剂浸取法，通常采用酸性溶液进行提 紫红到兰等不同颜色。现已查明，天然花色苷糖苷配 基的基本结构为3，5，7一三羟基一2一苯基苯并呋喃，结 酶工程技术等HJ。分离纯化的方法主要是层折法， 构式如图1所示。 OH H CC)等。 1．1纸层析 纸层析是分离天然色素的一种较为传统的方法， 其具有快速，设备简便等优点。对于花色苷的分离常 化合物名称 B环取代 用新华No．3或whatmanNo．3层析，以水系溶液为 3’ 5’ 展开剂，如酸化正丁醇水溶液(BAW：正丁醇．乙酸．水 天竺葵色素(pelargonidin)一H 一H 矢车菊色素(cyanidin) 一0H —H 体积比=4：1：5)。展开后，剪下色斑，以酸化甲(乙) 飞燕草色素(delphinidin)—oH —oH 醇洗涤，浓缩，即可得到样品。 芍药色素(peonidin) —oCH3 —H 苏红等人b』采用3次纸层析法得到甘蓝红色素 矮牵牛色素(peturidin) 一OCH， 一0H 锦葵色素(malvidin) 一oCH， 一0CH， 的主要花色苷——矢车菊素．3．双芥子酰槐二糖一5一葡 图1 6种主要的花色苷兀 层析纸，上行法。 由于苯环中取代基、羟基和甲氧基数量和位置不 1．2柱层析 同，衍生出6种主要的花色苷元(见图1)【1J。在花色 柱层析也常被应用在花色苷类色素的分离提纯 素A环3，5，7位上的羟基以糖苷键与糖结合时使形 中。早期主要填料为氧化铝，后来多采用阳离子交换 成花色苷，由于糖结合的方式(结合糖的种类、数量、 树脂、聚酰胺、聚乙酰吡咯烷酮(PVP)，或甲醛酚醛树 位置)的不同花色苷的种类也不相同。只结合一个糖 脂等。 时，一般结合于花色素骨架的^3位上，结合2个糖时， Sulyok和Balint等人16J将除去乙酸乙酯的提取 一般分别结合于3位和5位的羟基处，有时也发生3 液上AmberlitexAD一7柱，用蒸馏水洗脱至流出液无 位和7位的结合。根据花色苷所结合的糖、有机酸的