双水相萃取分离葡萄酒发酵下脚料中葡萄籽蛋白质-云南大学.PDFVIP

云南大学学报（自然科学版），２０１３，３５（６）：８２４～８３２ ＤＯＩ：１０．７５４０／ｊ．ｙｎｕ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｙｕｎｎａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ 双水相萃取分离葡萄酒发酵下脚料中葡萄籽蛋白质∗ 张喜峰，孙亚莉，李鑫文，刘洋，张芬琴 （河西学院农业与生物技术学院，甘肃 张掖　 ７３４０００） 摘要：采用聚乙二醇（ＰＥＧ）／ （ＮＨ ） ＳＯ 双水相体系分离纯化葡萄籽中的蛋白质．确定其双水相体系组成 ４ ２ ４ － ２０％ ＰＥＧ６００ ２０％（ＮＨ ） ＳＯ ，通过单因素和星点设计探讨ＮａＣｌ质量分数、ｐＨ值、温度、粗提液加入量对萃取 ４ ２ ４ 效果的影响．结果表明：温度和蛋白质粗提液加入量对蛋白质萃取效果影响最大，其次为ＮａＣｌ质量分数，ｐＨ 的 影响较小．最佳萃取条件是：ＮａＣｌ质量分数０．０６％、ｐＨ为７．０５、温度２５℃、蛋白质粗提液与双水相体系体积比 为３．９７ ∶１０，在此条件下萃取率达７７．５２％，分配系数为４．６１． 关键词：双水相萃取；星点设计；葡萄籽蛋白质 － － － 中图分类号：ＴＳ２０９　 　 文献标志码：Ａ　 　 文章编号：０２５８ ７９７１（２０１３）０６ ０８２４ ０９ 　 　 在葡萄酒加工过程中，每年产生约占葡萄加工 净的葡萄籽． 量２０％～３０％的大量皮渣废弃物，其中主要是葡萄 聚乙二醇（ＰＥＧ６００、１０００、２０００、４０００、６０００）， 皮、种子和果梗等．葡萄籽作为葡萄酒行业的主要 天津市光复精细化工研究所；硫酸铵、氯化钠，天津 下脚料，葡萄籽提取物中含有大量多酚类、脂类、维 开发区海光化学制药厂；氢氧化钠、盐酸、磷酸氢二 － 生素和矿物质等多种成分，对多种疾病有预防和治 钠、磷酸二氢钠、考马斯亮蓝 Ｇ ２５０、８５％磷酸、 － ［１ ８］ 疗作用 ．目前我国对葡萄籽中蛋白质的研究相 ９５％ 乙醇，天津天新精细化工开发中心；牛血清蛋 对较少，葡萄籽中含有丰富的粗蛋白，高效充分提 白，科昊生物工程有限责任公司． － 取蛋白质，可为葡萄籽蛋白利用开辟新的途径． １．２　 仪器与设备　 ＤＫＢ ５０１超级恒温水浴锅，扬 ［９］ ［１０］ 李凤英 、仵昱舟 利用传统的碱溶法和酶 州市三发电子有限公司；７２２ 型可见分光光度计， － 溶法浸提葡萄籽粗蛋白质，但是在实际工业化生产 上海光谱仪器有限公司；ＸＯ ＳＭ５０ 超声波微波组 中存在操作繁琐、周期较长的缺点，且酶溶法引入 合反应系统，南京先欧仪器制造有限公司；ＤＨＧ－ 新的蛋白质，为分离纯化增加了难度．而双水相萃 ９１０１·１型电热恒温鼓风干燥箱，扬州市三发电子