ANA抗DNP抗体及抗ENA谱联合检测对SLE诊断价值和临床意义.docVIP

ANA抗DNP抗体及抗ENA谱联合检测对SLE诊断价值和临床意义 　　【摘要】　目的：探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者ANA、抗DNP、抗ENA谱联合检测的应用与临床意义。方法：对100例SLE患者及80例同期就诊的其他结缔组织疾病患者进行ANA、抗DNP抗体、抗ds-DNA抗体及抗ENA抗体的检测。同时对ANA检测的两种不同方法及传统的LE细胞检测法与抗DNP抗体检测法进行了对比。结果：采用这四种检测方法联合检测在SLE诊断中具有互补作用，可提高SLE的检出率。快速IFA法检测ANA优于ELISA法，抗DNP抗体检测优于LE细胞法。结论：快速IFA法检测ANA与抗DNP抗体的检测均为目前诊断SLE患者的先进且实用的方法，值得推广应用。 　　【关键词】　系统性红斑狼疮；　抗核抗体；　抗双链DNA（ds-DNA）抗体；　抗-组蛋白复合物（DNP）抗体；　可提取核抗原（ENA）抗体；　检测分析 　　系统性红斑狼疮（SLE）是一种多系统受累的自身免疫性疾病，伴有多种自身抗体。由于以往检测方法的局限及检测试剂的抗原相对不全，对自身抗体检出率及对SLE诊断和预后判断都造成一定困难。近年来本院采用四种检测方法联合检测在SLE诊断中具有互补作用，可提高SLE的检出率，现报道如下。 　　1　资料与方法 　　1.1　一般资料　SLE患者100例，其中男24例，女76例。年龄12~75岁。全部病例均系2009年1月-2011年12月本院住院及门诊患者。患者诊断符合美国风湿病学会1922年修订标准，设为SLE组。对照组80例中男26例，女54例，年龄20~60岁。其中类风湿（RA）36例，干燥综合征（SS）12例，硬皮病（PSS）4例，皮肌炎（DM）4例，其他未定型结缔组织病（CTD）24例。静脉采血，血清冻存待检或新鲜检测。 　　1.2　试剂与方法 　　1.2.1　ELISA法ANA检测　试剂盒由美国Hope公司生产。利用纯化核抗原包被反应孔。 　　1.2.2　快速IFA法ANA检测　试剂盒由德国欧蒙实验免疫制品有限公司生产。该试剂盒将灵长类猴肝组织和Hep-2细胞制成超微薄片，固定在同一抗原基质区，对同一份标本进行平行测定。 　　1.2.3　抗ENA抗体检测　试剂由德国欧蒙实验免疫制品有限公司生产。用经亲和层析纯化的天然抗原（Sm，UI-RNP/Sm，SS-A，SS-B，Scl-70，Jo-1）包被于反应膜条上。方法为免疫斑点法。 　　1.2.4　抗DNP抗体检测　试剂盒由英国OMEGA公司生产。方法为胶乳凝集法。 　　1.2.5　LE细胞检测　采用改良血块法。 　　1.2.6　抗ds-DNA抗体检测　试剂盒由福州蓝波公司生产。方法为金标免疫斑点法。 　　1.3　操作严格按照试剂说明书操作。 　　2　结果 　　3　讨论 　　随着免疫学检验的发展对SLE的研究进一步深入。在患者血清中陆续发现多种自身抗体。以抗DNP抗体、抗ds-DNA抗体及抗Sm抗体为主。据本文统计，其阳性率分别为80%、64%、68%。ANA阳性率为92％。ANA检测中有4例阴性，而抗ENA抗体阳性。2例ANA阴性，而抗DNP抗体阳性。原因可能与这些患者处于非活动期或已经治疗，ANA度下降有关。故快速IFA法及ELISA法检测ANA阴性时，不能排除自身抗体的存在。因此，ANA阴性时不能否认SLE的诊断[1-2]。通过ELISA法与快速IFA法对ANA同时检测，统计学结果表明，两者具有较好的符合率（92.2%）。ELISA法由于其操作简便较适合于大批量标本检测。但由于细胞内多种抗原成分人工复制较困难，且受到细胞靶抗原的抗原性浓度、结构等方面的制约。相对而言，快速IFA法因其快速、可靠、重复性好、便于标准化和质控等优点，日益成为ANA检测的“金标准”。运用快速IFA检测ANA，有两种抗原基质同时检测，核型更为清楚，且可测定抗体滴度。从而为临床诊断提供更详细的信息[3-4]。从表1中可见，对照组中ANA阳性率也较高。故ANA在SLE患者中敏感度虽很高，特异性却不高。袁学蓉等[5-6]提出对ANA阳性患者应进一步查抗ds-DNA、抗Sm抗体等。 　　抗ds-DNA是SLE的特异性抗体。本文SLE组阳性率为64%，对照组为10％。据报道抗ds-DNA与疾病的活动性有关。活动期SLE患者阳性率一般在80％以上。本组SLE患者阳性率偏低，可能与试验方法及部分患者处于非活动期有关。本组患者中，有4例处于活动期的患者查不出抗ds-DNA抗体，可能是血清中有过多游离DNA抗原与相应的DNA抗体结合的缘故。因此，抗ds-DNA阴性不能排除SLE的存在[7]。另外，SLE患者出现此抗体常提示有肾脏损害。本组SLE患者抗ds-DNA抗体阳性64例，其中伴狼疮肾炎（LN）38例。表1资料中对照组8例阳