2017年春季成都市猪瘟免疫抗体监测和分析.docVIP

2017年春季成都市猪瘟免疫抗体监测和分析 　　摘要 为评估成都市猪瘟疫苗接种的免疫效果，采用ELISA方法对从成都市15个管辖区（市）县规模化猪场、散养户和屠宰厂采集的910份猪血清样品进行了猪瘟病毒免疫抗体的检测。结果表明，规模化猪场、散养户和屠宰厂受检样品的猪瘟病毒免疫抗体合格率分别为95.71%、99.29%、89.76%，免疫抗体平均合格率为94.07%，散养户猪瘟病毒免疫抗体合格率稍高于规模化猪场。 　　关键词 猪瘟；免疫抗体；监测；四川成都；2017年春季 　　中图分类号 S858.28 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2017）22-0228-02 　　Abstract In order to evaluate the immune effect of swine fever vaccine in Chengdu City，the swine fever virus immune antibody of 910 samples which collected from large-scale pig farms，scatter-feed households and slaughterhouses were detected by ELISA method.The results showed that the qualified rate of swine fever virus immune antibody of the detected samples collected from large-scale pig farms，scatter-feed households and slaughterhouses were 95.71%，99.29% and 89.76% respectively，the average qualified rate of immune antibody was 94.07%，and the qualified rate of swine fever immune antibody of the scatter-feed household was slightly higher than the large-scale pig farms. 　　Key words swine fever；immune antibody；surveillance；Chengdu Sichuan；spring of 2017 　　猪瘟俗称“烂肠瘟”，是一种由猪瘟病毒引起的具有高度传染性疫病，致死率高，是威胁养猪业的重要传染病之一。其临床典型特征是全身皮肤、浆膜、黏膜和内脏器官有不同程度的出血，而现在临床上的普遍情况是非典型化的、亚临床感染、持续感染及隐性感染等[1-2]。猪瘟被国际兽医局列为A类传染病[3]，我国将其列为一类疫病。 　　为有效做好猪瘟的防疫工作，成都市在每年2月和8月为管辖的15个区（市）县发放猪瘟疫苗，进行春、秋2季集中免疫。为切实了解2017年春季猪瘟疫苗免疫实施情况和评估免疫效果，根据免疫计划要求，于2017年5月对所有发放疫苗的区（市）县的部分规模场、散养户和屠宰厂采集血清样品，采用猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒对采集样品进行免疫抗体水平的检测。 　　1 材料与方法 　　1.1 试验材料 　　检测试剂为武汉科前生物股份有限公司猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒，批号为160507。 　　样品血清样品采集自成都市管辖的15个区（市）县的规模养殖猪场、散养户和屠宰厂，共计910份样品。 　　1.2 试验方法 　　1.2.1 准备。使用前将所有试剂平衡至室温。用样品稀释液2倍稀释待检血清和阳性、阴性对照；摇匀洗涤液后，用蒸馏水或去离子水作20倍稀释。 　　1.2.2 检测步骤。每孔加入稀释好的洗涤液200 μL到抗原包被板，静置1 min倒掉液体，洗板3次，最后一次在吸水纸上拍干。再分别将稀释好的待检血清和对照各取100 μL加入到抗原包被板孔中，阴性对照和阳性对照各设2孔，轻轻振匀孔中样品，置37 ℃ 温育2 h。甩掉板孔中的溶液，每孔加入稀释好的洗涤液200 μL，静置1 min倒掉，洗涤3次，最后在吸水纸上拍干。每孔加酶标记物100 μL，置37 ℃ 温育30 min。洗涤5次，方法同上。每孔先加底物液A（50 μL）、再加底物液B（50 μL），混匀，室温（20～25 ℃）避光显色10 min。每孔加终止液（50 μL），10 min内测定结果。 　　1.2.3 检测结果判定。在酶标仪上测各孔的OD630 nm值。试验成立的条件为阴性对照平均OD630 nm值≥0.500，阳性对照的阻断率50%。 　　阻断率（%）=