基于微流控芯片的尿路感染细菌鉴定及抗生素敏感性测试.PDFVIP

第44卷 分析化学 (FENXI HUAXUE)摇 研究报告 第4期 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 2016年4月 ChineseJournal of Analytical Chemistry 610~616 DOI:10.11895/j.issn.0253鄄3820.160035 基于微流控芯片的尿路感染细菌鉴定及抗生素敏感性测试 1 1 1 1 1,2 *1,2 1,2 齐明月摇 杜 燕摇 刘未平摇 陈斌摇 梁广铁 摇 徐邦牢 摇 刘大渔 1(广州医科大学附属广州市第一人民医院检验医学研究室,广州510180) 2(广东省临床分子医学及分子诊断重点实验室,广州510180) 摘摇 要摇 发展了一种微流控芯片纸基细菌分析技术,用于多重细菌鉴定与抗生素敏感性测试。 制备了阵列培 养池芯片,以滤纸作为衬底固定显色培养基和抗生素。 利用PVDF疏水薄膜止流阀,将尿液样品引入芯片并 分隔于不同培养池。 借助于培养池阵列的空间分辨力,实现多重细菌分析。 根据特异性显色结果实现细菌鉴 定,通过实时显色强度分析实现细菌定量,依据抑制显色反应的最低抗生素浓度确定抗生素敏感性。 以3种 泌尿系统感染常见病原菌(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和粪肠球菌)为模拟测试对象进行分析,结果表明,芯 片方法可以在18 h 内实现对3种细菌的同时鉴定及6种抗生素敏感性测试。 对照实验显示,芯片法与传统 方法细菌鉴定和抗生素敏感性测试结果一致性分别为94.1%和93.9%。 本研究建立的微流控芯片细菌分析 方法简便快速,非常适合于医疗资源匮乏条件下的细菌分析。 关键词摇 微流控芯片;细菌鉴定;抗生素敏感性测试;快速检测 1摇 引摇 言 [1,2] 尿路感染是非常常见的感染性疾病 ,多由细菌引起,最常见的是大肠埃希菌,其次为粪肠球菌、 [2] 铜绿假单胞菌、葡萄球菌属细菌和肺炎克雷伯菌等 。 尿路感染可引起局部和全身不适症状,严重者 可导致肾功能衰竭,甚至感染性休克,因而需要及时诊断和治疗。 临床治疗尿路感染病例时,医生需要 [3,4] 了解病原菌的种类、数量以及对于抗生素的敏感性,以便进行针对性治疗 。 因此,临床上的细菌检 测平台,需具备多重病原菌快速定性与定量分析以及抗生素敏感性测试的功能。 传统的尿路感染病原菌鉴定及抗生素敏感性试验(Antibiotic susceptibility testing,AST)主要采用平 [5,6] 板培养法,但是耗时较长(一般需2~3 天) ,不利于及时诊断和抗生素选择指导。 近年开发出了尿 [7] [8] [9] 路感染病原菌检测新方法,如免疫荧光法 、干化学分析法 、流式细胞法 、聚合酶链式反应 [10] [11] [12] (PCR) 、质谱法 及新一代测序技术 等,虽然可以显著缩短检测时间,但这些方法大多依赖于大 型或者精密设备,难以在基层医疗单位推广。 因此,亟需简便、快速的尿路感染病原菌检测方法。 近年发展起来的微流控芯片细菌分析技术[13~19]较之传统方法具有很多优势。 首先,芯片细菌分析