水质 细总大肠菌群原始记录.docVIP

1. 目的 为确定本公司水质中菌落总数、大肠菌群测定使用方法，明确菌落总数、大肠菌群检测相关细则，指导人员正确作业，确保检测工作正常开展，根据《生活饮用水标准检验方法》GB5750.12-2006制订本方法作业指导书。 2. 适用范围 适用于水质中菌落总数、大肠菌群的测定。 3. 职责 检测人员严格按照本指导书要求开展检测工作。 4. 检测依据标准及检测方法 《生活饮用水卫生标准》GB 5749-2006 《生活饮用水标准检验方法》GB5750.12-2006 5. 标准值 表1 二次供水菌落总数、大肠菌群 序号 指标 限值 01 菌落总数 100CFU/mL 02 大肠菌群 不得检出 6. 检验仪器及设备 高压蒸汽灭菌器、恒温培养箱、冰箱、显微镜、PH试纸。 7. 试剂和材料 营养琼脂培养基，三倍浓缩乳糖蛋白胨培养液，伊红美兰琼脂，革兰氏染色液。 8. 检测程序 8.1 菌落总数：取采集的样品1mL于灭菌平皿内，倾入已融化冷却至45℃的营养琼脂15mL，同时做一个平行样和一个空白对照平皿，并立即摇匀。冷却后，翻转平板，置于35℃～37℃恒温箱中，培养48h。计数每个平板上的菌落数。 8.2 大肠菌群：在5支装有10mL双料乳糖蛋白胨培养液的试管各加水样10mL；在5支装有10mL单料乳糖蛋白胨的试管各加水样1mL，在5支装有10mL单料乳糖蛋白胨的试管各加稀释后的水样（1:10）1mL。轻摇试管，是液体充分混匀，置35℃～37℃培养箱中24h。观察是否产酸产气，若有，需进一步做证实试验。 8.3 取一环阳性管中的溶液接种到伊红美兰琼脂平板上，置35℃～37℃培养箱中18h～24h，观察菌落形态，典型的大肠菌群菌落为黑紫色或红紫色，具有金属光泽。 8.4 挑取可疑大肠菌群菌落1或2个进行革兰氏染色，同时接种乳糖发酵管，于36℃±1℃培养箱中，培养24h。 8.5 凡乳糖发酵管最终产酸、产气，革兰氏染色为阴性的无芽孢杆菌，为大肠菌群阳性。记下证实试验的阳性管数，查总大肠菌群（MPN）检索表得出100mL水样中总大肠菌群的MPN值。 9. 计算 菌落总数计算见式（1）： a=b×n………………………………(1) 式中： a—表示菌落总数，cfu/mL 平均菌落数 n—表示稀释倍数 10. 表格样式 附录A 水质中菌落总数、大肠菌群检测原始记录样式 附录A：水质中菌落总数、大肠菌群检测原始记录样式 二次供水检测原始记录 受理编号：中坚（ ）检[20 ] 号 检测项目： 细菌总数、大肠菌群 检验日期： 年 月 日 依据：《生活饮用水标准检验方法》GB/T 5750.12-2006 一、实验条件： 1、实验室温度： ℃； 实验室湿度： %； 2、仪器设备：恒温培养箱(仪字第 号 )；生物显微镜(仪字第 号 ) 3、培养基： 厂家： 批号： 厂家： 批号： 厂家： 批号： 二、结果： 1、细菌总数： 放置时间： 取出时间： 样品编号 菌落数(cfu/皿)( ℃ h) 结果(cfu/mL) 平皿1 平皿2 检验者： 复核者： 日 期： 年 月 日 日 期： 年 月 日 2、总大肠菌群： 放置时间： 取出时间： 样品编号 培养温度及时间 接种样品量 结果 (MPN值/100mL) 10mL（原样）×5管 1.0mL（原样）×5管 1mL（1:10）×5管 ℃ h 乳糖蛋白胨 ℃ h EMB平板 革兰氏染色镜检 ℃ h 乳糖发酵管 ℃ h 乳糖蛋白胨 ℃ h EMB平板 革兰氏染色镜检 ℃ h 乳糖发酵管 ℃ h 乳糖蛋白胨 ℃ h EMB平板 革兰氏染色镜检 ℃