紫外可见分光光度计的应用非常广泛在食品检验.PPT

1、样品池设计不合理引起误差 UV-7230型紫外可见分光光度计 其他型号仪器 仪器的校验 仪器波长准确度的检查 日常在使用分光光度计时，是否要经常进行仪器波长准确度的检查？ 答案是否定的。 当在日常测定中发现仪器测定灵敏度下降，这时才应进行波长准确度的检查，最简易的检查方法（粗检）是：仪器开机后，调节波长为 580nm，在吸收池座的通光道中插入一张白色卡片纸，若能观察到一长方形的黄色光斑，说明波长准确度属正常范围，否则就应进行波长校正。 当仪器经过长途搬运、受过机械振动或更换光源灯泡后，必须进行波长准确度的检查与校正。粗检同上 透射比的准确度通常是用硫酸铜、硫酸钴铵、重铬酸钾等标准溶液来检查，其中应用最普遍的是重铬酸钾（K2CrO7）溶液。 透射比正确度检验的具体操作是：质量分数w（K2CrO7）=0.006000%(即1000g溶液中含K2CrO7 0.06000g)的0.001mol/L HClO4 K2CrO7标准溶液。以0.001mol/L HClO4 为参比，以1cm的石英吸收池分别在235nm、257nm、313nm、350nm波长处测定透射比，与下表所列标准溶液的标准值比较，根据仪器级别，其差值应在0.8%~2.5%之间。 透射比正确度的检验 仪器的校验 根据JJG（国家计量检定规程） 178-96规定，石英吸收池在220cm处装蒸馏水；在350nm处装K2CrO7 0.001mol/L HClO4溶液；玻璃吸收池在600nm处装蒸馏水；在400nm处装K2CrO7溶液（浓度同上）。 用一套比色皿装待测试样的溶剂，以其中一个为参比，调节τ为100%，测量其他各池的透射比，透射比的偏差小于0.5%的吸收池可配成一套。 仪器的校验 吸收池成套性检验 学生实训中可采用此简便方法： 用铅笔在洗净的吸收池毛面外壁编号并标注光路走向。在吸收池中分别装入测定用溶剂，以其中一个为参比，测定其他吸收池的吸光度。若测定的吸光度为零或两个吸收池吸光度相等，即为配对吸收池。若不相等，可以选出吸光度值最小的吸收池为参比，测定其他吸收池的吸光度，求出修正值。测定样品时，将待测溶液装入矫正过的吸收池中，测量器吸光度，所测得的吸光度减去该吸收池的修正值即为此待测液真正的吸光度。 日常维护、保养 对仪器工作环境的要求 稳固的工作台 温度、湿度合适 仪器保养和维护方法 仪器工作电源 光源使用注意事项 正确使用吸收池 （1）首先，在使用仪器前必须认真阅读仪器说明书。用户应当了解仪器的校正法，如波长精度的校正，光源灯的调整等，在仪器使用说明书中都有详细介绍。仪器说明书应当妥善保存，以便随时查阅。只要按仪器说明书操作使用，一般不会出现大的问题。 日常维护、保养 (2)仪器必须设专人保管使用。使用者应熟知仪器各旋钮、按键的功能和作用。 比如，仪器用完后波长的停放位置，即使说明书中未作明确规定，但为不发生意外，波长置300~400nm处为好，因为有相当‘部分故障是由于是停用时波长位置不当引起的。 例如：将波长手轮拧到了极限处，这时单色器内光栅与波长正弦机构脱离，再次使用时，由于波长计数装置齿轮与单色器内波长正弦机构打滑，转动波长手轮时，虽然波长计数显示不断改变，但单色器内光栅并未正常运转，因而产生故障。 （3） 仪器使用前必须预热15~30分钟。预热时除打开总电源开关和所选用的光源开关外，应同时将挡光杆退出光路，使光电倍增管得到光照，并调粗调旋钮，使数字电压表(在量程旋钮置100%T档时)显示接近100.0，这样光电倍增管及负高压控制系统都进入预热状态，使用时更加稳定。 (4)如测试数据重复性不好，即同一样品重复测试，每次读数都有变化，甚至吸收度出现负值。这种情况是由于 一：多数是比色皿使用不当、比色皿污染或“参比”“样品”溶液中含有杂质等原因造成的。 二：光电转换器（如光电管）因长时间使用其光电转换效率发生了变化导致。这时标准溶液与待测溶液的吸光度都同样变低，在相对定量时对结果影响很小。但是对这类仪器，一般建议连续使用时间不应超过 3h，若需长时间使用，最好间歇 30min。 另外，除酸碱及易挥发样品溶液外，不必一律将比色皿加盖。如果比色皿中溶液过多且加了上盖，这样即使在放入样品室之前已擦试干净，但由于振动或倾斜等缘故，溶液将不断从比色皿盖向外渗出，使所得数据不断变化。 有些溶液在刚注入比色皿时会产生大量气泡，附着在器壁上，此时应将比色皿静