蝴蝶兰PhAG1b基因的克隆及在突变体花器官中的表达分析.PDFVIP

４３８ 核 农 学 报　 ２０１８，３２（３）：０４３８～０４４７ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ＮｕｃｌｅａｒＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ 文章编号：１０００⁃８５５１（２０１８）０３⁃０４３８⁃１０ 蝴蝶兰ＰｈＡＧ１ｂ基因的克隆及在突变体花器官中 的表达分析 １ １ ２ １ １，∗ 袁秀云　 许申平　 雷志华　 张　 燕　 崔　 波 １ ２ （ 郑州师范学院生物工程研究所，河南 郑州　 ４５００４４；郑州师范学院生命科学学院，河南 郑州　 ４５００４４） 摘　 要：为深入研究兰科植物花器官发育的调控机理，采用ＲＴ⁃ＰＣＲ和ＲＡＣＥ技术从蝴蝶兰聚宝红玫瑰 中克隆了一个Ｃ类ＭＡＤＳ⁃ｂｏｘ基因ＰｈＡＧ１ｂ（ＧｅｎＢａｎｋ 登录号：ＫＹ４７５５８７），并分析了该基因在蝴蝶兰不 同组织和５ 类突变体花器官中的表达水平。 序列分析表明，该基因的ｃＤＮＡ 全长为１２５０ ｂｐ，含完整的 开放阅读框，编码２３４ 个氨基酸，包含ＭＡＤＳ和Ｋ⁃ｂｏｘ 结构域及ＡＧ基序。 系统进化树分析显示，该基 因编码蛋白与木石斛的ＤｃＯＡＧ１和建兰的ＣｅＭＡＤＳ２ 一致性最高。 转录表达分析表明，ＰｈＡＧ１ｂ基因在 营养器官中不表达，在花器官的萼片、侧瓣和唇瓣中也不表达，只在花器官的蕊柱和子房中表达，在授粉 后的子房中表达水平降低；在退化雄蕊变异为花瓣的突变体花器官中，ＰｈＡＧ１ｂ基因的表达水平没有变 化；在侧萼和侧瓣变异为唇瓣的突变体中，ＰｈＡＧ１ｂ基因在蕊柱中的表达水平明显降低，而在侧瓣退化与 蕊柱合生和侧瓣顶端长出花药的突变花器官中，ＰｈＡＧ１ｂ 基因在蕊柱中的表达显著升高。 由此可见， ＰｈＡＧ１ｂ基因主要参与花器官中蕊柱和子房的发育调控，其功能可能与Ｂ 类基因的功能互为消长。 该 研究结果为进一步探究兰科植物花器官发育的分子调控机理提供了依据。 关键词：蝴蝶兰；ＡＧＡＭＯＵＳＥ 家族；ＭＡＤＳ⁃ｂｏｘ；花器官突变体 ＤＯＩ：１０１１８６９／ ｊ．ｉｓｓｎ．１００⁃８５５１２０１８０３０４３８ 　 　 随着分子生物研究技术的发展，人们对植物花器 “ＡＢＣＤＥ”模型。 由此可见，对单子叶植物花器官发育 官发育分子调控机制的研究也越来越深入，经过多年 基因的深入研究有助于进一步揭示被子植物花器官多 的研究，形成了目前广为接受的花器官发育的 样性的分子调控机制。 “ＡＢＣＤＥ”模型。 该模型认为，Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ ５ 类基因 兰科植物是被子植物的第二大科，被认为是单子 ［１］ 的特异表达确定了花器官各轮的身份 。 除了 叶植物中最进化的类群，其花型奇特多样，具有鲜艳的 ＡＰＥＴＡＬＡ２基因，这些基因大部分都属于ＭＡＤＳ⁃ｂｏｘ家 花色和明显的分轮，既有同轮花瓣的变异（花瓣和唇 ［２］ 族 。 然而该模型的提出主要是基于拟南芥和金鱼 瓣），又有雌蕊和雄蕊的合生（蕊柱），是单子叶植物研 草等双子叶模式植物，对于单子叶植物，不同科属植物 ［８］ 究花器官发育的理想材料 。 近年来，兰科植物花发 的花器官各有特征，如禾草类的花被片退化，百合类的 育基因的相关研究也越来越多［８－１０］ ，研究者除了提出