胎盘间充质干细胞分离和培养20160721.docxVIP

胎盘间充质干细胞的分离，原代与继代培养及鉴定 刘亭 2016.7.21 目录 TOC \o 1-3 \h \z \u HYPERLINK \l _Toc456879800 前言 PAGEREF _Toc456879800 \h 2 HYPERLINK \l _Toc456879801 1分离制备PMSC组织的选取 PAGEREF _Toc456879801 \h 3 HYPERLINK \l _Toc456879802 2脐带，胎盘MSC的分离与纯化 PAGEREF _Toc456879802 \h 5 HYPERLINK \l _Toc456879803 2.1胎盘组织的获取，存储与清洗 PAGEREF _Toc456879803 \h 5 HYPERLINK \l _Toc456879804 2-2 脐带，胎盘MSC的分离及纯化方法 PAGEREF _Toc456879804 \h 6 HYPERLINK \l _Toc456879805 3 原代培养和继代培养 PAGEREF _Toc456879805 \h 10 HYPERLINK \l _Toc456879806 3-1培养基 PAGEREF _Toc456879806 \h 10 HYPERLINK \l _Toc456879807 3-2培养密度 PAGEREF _Toc456879807 \h 11 HYPERLINK \l _Toc456879808 3-3培养条件 PAGEREF _Toc456879808 \h 11 HYPERLINK \l _Toc456879809 3-4换液 PAGEREF _Toc456879809 \h 11 HYPERLINK \l _Toc456879810 3-5 传代培养 PAGEREF _Toc456879810 \h 12 HYPERLINK \l _Toc456879811 3-6细胞形态与生长速度 PAGEREF _Toc456879811 \h 12 HYPERLINK \l _Toc456879812 3-7 MSC的冻存与复苏： PAGEREF _Toc456879812 \h 12 HYPERLINK \l _Toc456879813 4细胞表面抗原检测 PAGEREF _Toc456879813 \h 13 HYPERLINK \l _Toc456879814 5生长曲线 PAGEREF _Toc456879814 \h 13 HYPERLINK \l _Toc456879815 6细胞周期 PAGEREF _Toc456879815 \h 13 HYPERLINK \l _Toc456879816 7分化潜能 PAGEREF _Toc456879816 \h 13 HYPERLINK \l _Toc456879817 参考文献 PAGEREF _Toc456879817 \h 13 HYPERLINK \l _Toc456879818 附件1不同实验室从脐带血，脐带和胎盘等各组织中分离MSC的方法 PAGEREF _Toc456879818 \h 15 HYPERLINK \l _Toc456879819 脐带血 PAGEREF _Toc456879819 \h 15 HYPERLINK \l _Toc456879820 脐带 PAGEREF _Toc456879820 \h 15 HYPERLINK \l _Toc456879821 羊膜 PAGEREF _Toc456879821 \h 17 HYPERLINK \l _Toc456879822 绒毛膜 PAGEREF _Toc456879822 \h 18 HYPERLINK \l _Toc456879823 蜕膜层 PAGEREF _Toc456879823 \h 18 HYPERLINK \l _Toc456879824 胎盘 PAGEREF _Toc456879824 \h 19 HYPERLINK \l _Toc456879825 整体灌注法 PAGEREF _Toc456879825 \h 20 HYPERLINK \l _Toc456879826 附件2 背景知识 PAGEREF _Toc456879826 \h 20 HYPERLINK \l _Toc456879827 附件3 PMSC实验所需试剂 PAGEREF _Toc456879827 \h 21 前言 干细胞（Stem cell，SC）是一种能够自我更新且未分化并可分化成两个或两个以上其它品系的细胞。在一定的条件下，干细胞能够分化成为多种成熟细胞类型。按