榨菜叶中RNA提取及硫苷酶基因序列测定和分析.docVIP

榨菜叶中RNA提取及硫苷酶基因序列测定和分析 　　摘 要：采用Trizol试剂法从榨菜叶中提取RNA，采用RT-PCR技术扩增得到硫苷酶基因保守序列，利用DNAman7生物信息分析软件对测得的保守序列与菜心硫苷酶基因保守序列进行比对，翻译核苷酸和蛋白质序列与芸薹属油菜、菜心、甘蓝、芥菜等序列进行相应的比对。结果表明，采用Trizol试剂法能获得320 bp的基因保守序列;与甘蓝、菜心硫苷酶基因保守序列比对结果的Identity为97.12%;与芸薹属油菜、菜心、甘蓝等进行相应的翻译核苷酸和翻译成蛋白质序列比对分析，发现序列的覆盖度与相似度均达到较高的水平。 　　关键词：榨菜;硫苷酶基因;保守序列 　　 硫苷酶即硫代葡萄糖苷酶，主要存在于十字花科植物中，能催化硫代葡萄糖苷即硫苷，水解产生异硫代氰酸盐、葡萄糖、硫代氰酸盐等物质，有较好的防癌和抗菌功效[1，2]。同时，硫苷―硫苷酶系统作为植物本身来说是一个很好的自我防备体[3]，此体系在探究防御病虫害方面目前已进入热潮。研究发现，硫苷酶是一类非组织型表达蛋白，通常在植物体内含量较少，因此，从植物获取较多的硫苷酶很难实现[4，5]。重庆涪陵盛产榨菜，利用此优势，对榨菜硫苷酶基因进行研究，加大对榨菜叶的充分利用，为生产优质榨菜产品的创新过程提供一定依据，具有广大的社会、经济和生态效益。 　　 目前对于硫苷酶基因的研究大多是以油