第十三章 基因的转录、转录后加工与逆转录.pptVIP

第十三章 基因的转录、转录后加工及逆转录 ;◆转录(transcription)： 以DNA单链为模板，NTP为原料，在DNA依赖的RNA聚合酶催化下合成RNA链的过程。 ◆转录的条件： ;◆转录、复制的异同点;◆几个基本概念;结构基因(structure gene)： DNA分子中能转录出RNA的区段。;模板链：反意义链（antisense，(-)链）—— 以该链中的DNA碱基顺序指导RNA的合成即被转录的那条DNA链。;5’-----GCAGTACATGTC-----3’编码链 DNA 3’-----CGTCATGTACAG-----5’模板链 5’-----GCAGUACAUGUC-----3’ mRNA N ------Ala--Val--His--Val------C 蛋白质;不对称转录 1.DNA双链上，一股链可转录，另一股不转录。2.有意义链与反意义链并非固定不变。3.转录方向都是5’ 3’;第一节 参与转录的酶 RNA聚合酶——依赖DNA的RNA聚合酶（DNA-dependent RNA polymerase,DDRP）;一、原核生物RNA聚合酶;全 酶 核 心 酶 ;二、真核生物RNA聚合酶（三种）; 第二节? 转录过程 (起始、延长、终止) ;DNA模板  启动子（promoter）1、概念:转录开始时能与RNA全酶结合的DNA顺序（双链）2、原核生物启动子的特点:(1)DNA序列在转录起始点的5’端区(上游区)(2)-10bp处 -TATAAT- (Pribnow box)(3)-35bp处 -TTGACA-;σ因子 RNA聚合酶中识别及结合启动子的亚基，延长时脱落，不参与转录过程，是转录辅助因子。 σ因子识别位点：启动子-35区、-10区;原核生物有多种σ因子 一般情况下起作用的是---σ70 σ70 有四个保守区域： 第2区域、第4区域和-35区和-10区结合 ;结合过程： 闭和的启动子复合体 RNA聚合酶（全酶）中的σ因子在DNA双链 上迅速、随机滑动，寻找到启动子-35区， 形成疏松的复合物，DNA双链未解开。 开放的启动子复合体 RNA聚合酶（全酶）移向-10区和转录起始 点在-20区DNA双链解开12-17bp时的启动子 复合体。;σ;2、真核生物的起始 较原核生物复杂 ◆顺式作用元件 (启动子/增强子) ◆转录因子(transcription factor,TF) RNA聚合酶Ⅱ所需的转录因子 ---转录因子Ⅱ （TFⅡ）;◆真核生物启动子（1）DNA序列在转录起始点的5’端区(上游区)（2）-25bp ：TATA盒（Hogness box） （3）-90bp ：GC盒（4）-70bp ：CAAT盒 ;RNA聚合酶Ⅱ催化的转录起始; 真核生物转录起始复合物的组装 启动子TATA盒+ TFⅡD +D-A复合物(TFⅡD+ TFⅡA) + TFⅡB +(RNA聚合酶+ TFⅡF)复合物 +TFⅡE 、TFⅡJ +TFⅡH（解旋酶、蛋白激酶） DNA解旋、RNA聚合酶C-端Ser磷酸化 从起始点向下游移动;TBP---TATA binding protein TAF---TBP-associated factors;TAFs;二、延长---- 转录泡（1）RNA聚合酶（核心酶）　◆与DNA模板紧密结合，沿3’ 5’方向移动　◆解旋作用：DNA解开17 bp　◆聚合功能（不具外切酶功能） （2）杂交螺旋 ◆ RNA-DNA形成12bp长的杂交螺旋 ◆ 转录产物RNA沿5’ 3’方向延长 ◆ RNA延长速度：50个核苷酸/秒/每分子酶;核心酶;三. 终止  转录至模板某一位置 停止形成磷酸二酯键  RNA—DNA杂交链解开 DNA解链的部分重新形成双螺旋 RNA聚合酶离开DNA;终止的方式 ;ρ-因子的作用 ;新生RNA;不依赖ρ-因子的终止 DNA模板上有终止信号 转录出来的RNA RNA聚合酶遇此结构 即停止工作。 DNA和RNA（dA：rU） 稳