人工牛黄薄层指纹图谱多元图像分析及化学计量学的研究.docVIP

人工牛黄薄层指纹图谱多元图像分析及化学计量学的研究 　　[摘要] 建立了人工牛黄薄层指纹图谱，对其图像进行数字化和化学计量学研究。首先采用以环己烷-乙酸乙酯-乙酸-甲醇（2∶7∶1∶2）为展开剂，10%硫酸乙醇溶液为显色剂，105 ℃加热至斑点清晰，并在366 nm下采集数码图像。然后将该图像转换成为灰度图像，得到指纹图谱的灰度曲线图多元数据，并采用主成分分析法对多元数据进行分析。结果表明薄层指纹图谱可表征不同生产企业生产的人工牛黄，并且分析得到图谱上表征来源的特征区域。该方法简便，快速，适合用于不同来源的人工牛黄质量差异的评价。 　　[关键词] 人工牛黄；薄层色谱；指纹图谱；胆汁酸；化学计量学；主成分分析 　　[Abstract] A method of thin-layer fingerprinting chromatogram of artificial cow-bezoar was established with the developing solvent consisting of cyclohexane，ethyl acetate，acetic acid and methanol （2∶7∶1∶2），and 10% sulfuric acid ethanol solution sprayed as colour-developing agent. After heated at 105 ℃，TLC was recorded as an image in ultraviolet light at 366 nm which was converted into grayscale. By the gray value extracted from the grayscale，the multivariate data obtained from TLC of samples could be analyzed by chemometric method. The results indicated that samples from different manufacturers could be distinguished by this method and some specific bands were found out. All in one，this simple and practical method was suitable for the evaluation of quality difference. 　　[Key words] artificial cow-bezoar；TLC；fingerprinting；bile acids；chemometrics；principle component analysis 　　人工牛?S是目前最常用的牛黄替代品，多用作成药复方的原料，据笔者统计，在《中国药典》2010年版一部中有近40个品种的成药配方中使用了人工牛黄，涉及国药生产准字文号达100余个[1]。人工牛黄由牛胆粉、胆酸、猪去氧胆酸、牛磺酸、胆红素、胆固醇、微量元素等加工而成，具有清热解毒，化痰定惊之功效[2]。其生产企业较多，生产工艺和原料质量参差不齐，目前对其质量评价或控制的研究多为胆酸类和胆红素等成分的测定[3-12]，采用的方法也多为高效液相色谱法。本文在以上研究的基础之上，采用图像的灰度数字化分析方法对人工牛黄的薄层色谱图片进行处理，并使用化学计量学的信号处理技术及模式识别方法对其进行了进一步的处理以及分析，以期为人工牛黄的生产工艺的规范和质量控制的研究提供思路及参考。 　　1 材料 　　Camag Linomat 5型半自动点样仪（瑞士Camag公司）；Digistore 2数码成像系统（瑞士Camag公司）；ChemDataSolution软件（大连达硕信息技术有限公司）。 　　对照品猪去氧胆酸（批号100087-200610）、胆酸（批号100078-200414）、鹅去氧胆酸（批号110806-201105）、去氧胆酸（批号724-200207）、牛磺胆酸钠（批号110815-201309）均来自中国食品药品检定研究院；甘氨胆酸钠（批号：PSMEN-AS）来自东京TCI公司。供试品为5个生产企业，共19个批次人工牛黄样品（经检验均符合《中国药典》2015年版标准），见表1。薄层色谱硅胶G板（德国Merck公司）；环己烷、乙酸乙酯、乙酸、甲醇、乙醇、硫酸等试剂均为分析纯。 　　实验材料，见表1。 　　2 方法与结果 　　2.1 供试品溶液的制备 分别取各供试品约0.1 mg，置于具塞锥形瓶中，加甲醇10 mL，超声提取10 min，过滤，即得。