非编码RNA对玉米穗行数性状调节作用地研究.pdf

摘 要 玉米是世界三大粮食作物之一，同时又是重要的经济作物和饲料作物。由于玉米产量是 一个复杂的数量性状，并受多个性状的综合作用，因此阐明玉米产量及其构成因子的遗传机 理，对选育优良的玉米品种将具有重要作用。在玉米产量的三个主要构成因子中，不同品种 的行粒数和百粒重受外界环境条件的影响较大，而穗行数是在雌穗分化过程中决定的，其遗 传力较高且受外界环境条件影响较小，对保证玉米产量具有重要作用。 miRNA是一类具有18—24 nt序列长度的非编码蛋白的内源小分子RNA，它们在植物生 长发育和逆境胁迫响应等过程中发挥着重要作用。因此，寻找与穗行数相关的miRNA，初 步揭示miRNA对玉米穗行数的调控作用，对揭示玉米穗行数形成的遗传机制具有重要意 义。 在课题组前期研究的基础上，以综3及构建的综3单片段代换系SSL．10为材料，通过 Solexa高通量测序技术和生物信息学方法获得玉米穗行数相关的miRNA及其靶基因。并利 用实时荧光定量PCR对与穗行数相关的miRNA和靶基因进行表达分析。主要结果如下： 于17个miRNA家族，它们在拟南芥、水稻等植物上均存在进化上的保守性。 2．发现的168个新的候选miRNAs，用最小自由能进一步筛选得到68个候选miRNAs， 对这些68候选miRNA在两个样品进行对照进一步确认得到31个新的miRNA。 3．对保守的85个已知保守的miRNA进行了靶基因预测。靶基因预测结果表明，85个 的靶基因是多个但属于一类，有部分miRNA的靶基因是多个且属于多个类型。这些靶基因 涉及了转录翻译、植物光合作用、逆境胁迫、信号转导等。 4．通过对数据的处理、荧光定量确认，以及对其靶基因的预测分析。综3和单片段代换 系SSL一10中差异表达的miRNA，通过调控其靶基因而最终影响到最终玉米穗行数的形成。 关键词：玉米；穗行数：高通量测序：miRNA；靶基因 ABSTRACT Maizeisoneoftheworld’Sthree food itisalsoan economicand majorcrops，and important traitofmaizeisa tOthecombined trait，andsubject foragecrops．Yield complexquantitative the mechanismofthemaize and effectsof traits，Therefore，toclarifygenetic yield multiple of factorswill an roleonthe offinevarietiesofmaize．Factor component playimportant breeding and100-kernel threemain ofthemaize indifferentvarietiesofkernelrOW components yield per theinfluenceofoutsideenvironmental rownumberear ear weightby conditions，and per by environmentalconditions andless tOex