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AB Real-Time PCR 仪器平台与技术原理.pdf
LifeTech Real-Time PCR
技术原理以及应用
AB定量PCR发展史
2011,QuantStudio 12K
2010,ViiA 7
2007,第四代产品StepOne StepOnePlus
2004,7300 7500
2003,AB获得荧光定量PCR仪器专利
2001,7000
2000,金标准——7900
1997,5700
1996,世界上第一台定量PCR——7700
2
AB拥有的Real-Time PCR相关的知识产权
• PCR仪器专利
• 定量PCR仪器专利
• VIC dye
• TaqMan MGB探针
3
目前AB定量PCR仪产品线
Applied Biosystems 7900HT Fast Applied Biosystems 7500 Fast
Real-Time PCR System Real-Time PCR System
Applied Biosystems StepOne™
StepOnePlus™ Real-Time
PCR System
Applied Biosystems 7300
Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR System
Real-Time PCR System
4
ViiA 7
Applied Biosystems ViiA 7 Real-
Time PCR System
5
QuantStudio
6
Real-Time PCR Technology Principle
起点定量与终点定量
相同样品进行96次扩增,由于PCR扩增效率的差异,扩增结果存在很大的差异
7
PCR动力学曲线和四个阶段
平台期
线性增长期
指数增长期
基线期
平台期
线性增长期
指数增长期
基线期
8
荧光定量PCR数学原理
基线 阈值 Ct值 [DNA]0
9
基线 阈值 Ct值 [DNA]0
什么是基线?
基线就是扩增曲
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