土家族常用基质调敷接骨膏粉末体外经皮吸收药动学的研究.docVIP

土家族常用基质调敷接骨膏粉末体外经皮吸收药动学的研究 　　摘要：目的 建立紫丁香苷、异嗪皮啶HPLC同步检测方法，考察接骨膏粉末用白醋、蜂蜜和凡士林为基质调敷时的体外透皮吸收特性，探讨土家族常用药膏基质的作用。方法 以离体大鼠腹部皮肤为透皮屏障，采用改良Franz扩散池模拟体外透皮吸收实验，用HPLC测定接收液中紫丁香苷、异嗪皮啶的含量，建立经皮吸收方程，计算累积渗透量、渗透速率等相关参数。结果 采用Syncronis C18色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 ?m），流动相为乙腈-0.1%磷酸（20∶80），流速1.0 mL/min，检测波长265 nm，紫丁香苷回归方程A=10 686.454 6C+1565.778 8（r=1.000 0），异嗪皮啶回归方程A=12 297.305 4C-5913.729 9（r=0.999 9）。以白醋、蜂蜜和凡士林为基质调敷接骨膏粉末及不添加基质时，紫丁香苷的稳态透皮速率分别为7.549 2、4.580 3、3.890 8、5.378 4 ?g?cm-2?h-1，累积透过百分率分别为25.66%、16.11%、13.73%、18.78%；异嗪皮啶的稳态透皮速率分别为2.536 9、1.941 8、1.178 2、2.293 6 ?g?cm-2?h-1，累?e透过百分率分别为47.04%、35.06%、22.11%、41.11%。结论 以白醋为基质，有利于促进接骨膏粉末中药效成分的经皮吸收；以蜂蜜和凡士林为基质，会阻滞接骨膏粉末中药效成分的经皮吸收，但可作为缓释基质使用。 　　关键词：蜂蜜；白醋；凡士林；接骨膏；紫丁香苷；异嗪皮啶；经皮吸收 　　接骨膏[1]（鄂药制字[2001]第MZ02-014号），为湖北民族学院附属民大医院于20世纪70年代初期开发的一种外用膏剂，处方来源于土家族民间流传甚广的“封刀接骨法”，原始方法是在四肢闭合性骨折手法复位后将活公鸡捣烂与土家族药物刺五加、刺老苞和独正杆配伍加工制成糊膏状，外敷跌打损伤的患处并固定。主治四肢骨折、跌打损伤（软组织损伤）、风湿疼痛等病症，有接筋续骨、疗伤止痛、活血化瘀等功效，研究表明该药对骨折的愈合、类风湿关节炎和膝骨关节炎骨髓水肿等均具有较好的治疗效果[2-7]。该制剂中刺五加为主药，其主要有效成分为紫丁香苷和异嗪皮啶等。本研究采用蜂蜜、凡士林、白醋作为基质调和接骨膏，以离体大鼠腹部皮肤为透皮屏障，采用改良Franz扩散池模拟体外透皮吸收实验，考察不同基质调敷接骨膏的经皮吸收药动学特征，为其制剂改良和临床运用提供参考。 　　1 仪器、试药与动物 　　Syncronis C18色谱柱（美国Thermo公司），V6A-02型Franz扩散池（接收池面积8 mL，通透面积1 cm2，美国Perme Gear公司），SC-15智能恒温槽（宁波新芝生物科技股份有限公司），HH-2数显恒温水浴锅（国华电器有限公司），BAS224S电子分析天平（德国赛多利斯公司），Centrifuge 5810R高速冷冻离心机（德国Eppendorf公司），KQ-600GVDV型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。 　　刺五加、刺老苞、独正杆，自采，经湖北民族学院中医药学院朱敏英副教授鉴定，分别为五加科植物刺五加Acanthopanax senticosus（Rupr. Et Maxim.）Harms的干燥根状茎、五加科植物黄毛?B木Aralia decaisneana Hance的根、葡萄科植物刺葡萄Vitis davidii Foex的根；凡士林（药用辅料），南昌白云药业有限公司；蜂蜜（药用辅料），江山市蜂农世家保健品有限公司；白醋，山西省太谷县双太酿造有限公司；紫丁香苷对照品（批号111574-201504）、异嗪皮啶（批号110837-201507），中国食品药品检定研究院；乙腈，美国默克公司；其他试剂均为分析纯。 　　SPF级SD大鼠，雌雄不限，5～6周龄，体质量（150±20）g，湖北省实验动物研究中心，动物许可证号SCXK（鄂）2015-0018。 　　2 方法与结果 　　2.1 紫丁香苷、异嗪皮啶含量测定方法的建立 　　2.1.1 色谱条件及系统适用性 色谱柱：Syncronis C18（250 mm×4.6 mm，5 ?m）；流动相：乙腈-0.1%磷酸（20∶80）；流速：1.0 mL/min；柱温：30 ℃；检测波长：265 nm；进样量：10 ?L。分别取200 ?g/mL紫丁香苷对照品溶液，100 ?g/mL异嗪皮啶对照品溶液，含紫丁香苷、异嗪皮啶分别为200、100 ?g/mL的混合对照品及阴性对照溶液（流动相）按上述色谱条件进样，结果见图1。由图可见，紫丁香苷的保留时间为10.02 min，异嗪皮啶的