2018细胞生物学技术教学案例.pptVIP

许多动物： 雌性一次产多个卵 （处于同一时期） 例2 受精 受精卵 同步卵裂 同步化细胞群体 概念：利用药物或其他方法使细胞停止在细胞 周期的某个时相。（人为地将处于不同 时期的细胞分离开来，从而获得不同时 期的细胞群体）。 特点：可调节、可恢复 意义：为特定细胞周期转变、细胞动力学、细 胞周期调控以及细胞在不同时相中对药 物的敏感性研究奠定基础。 人工同步化 温度休克法 短时间饥饿法 药物抑制法 离心淘洗法 使细胞停留在细 胞周期的不同时相 细胞周期中的检验点---蛋白质或多肽 人工同步化——实验范例 （1）实验用品 材料：HeLa细胞。 器材：培养瓶、移液器、枪头、小烧杯、10 ml吸管橡皮头、超净工作台、CO2孵箱、倒置相差显微镜、离心机。 试剂：无血清培养基、胎牛血清、1640培养液、0.25%胰蛋白酶溶液、PBS。 （2）实验步骤 血清饥饿法 （将细胞周期阻滞在G0/Gl） 对数生长期HeLa细胞 消化、离心、弃上清 pH7.4 ，37℃预温的PBS或无血清培养基洗涤 血清浓度低于0.5%的培养基中培养24～48 h 换为正常血清浓度的培养液， 使细胞重新进入细胞周期 细胞约在12 h后进入S期 细胞周期阻滞