桑天牛保幼激素生物合成机制及其对生殖的调控.docVIP

南京林业大学 博士学位论文桑天牛保幼激素生物合成机制及其对生殖的调控 姓名：田铃 申请学位级别：博士 专业：森林保护学 指导教师：嵇保中桑天牛保幼激素生物合成机制及其对生殖的调控 摘要 本文以桑天牛为对象，研究了雌、雄成虫内分泌器官咽侧体一心侧体复合体（Ｃｏｒｐｏｒａａ１１ａｔａ ａｎｄ ｃｏｒｐｏｒａ ｃａｒｄｉａｃａ，ＣＡ）及生殖器官在ＪＨ生物合成中的功能与角色分化，保幼激素（ＪＨ）和ＭＡＧ内容物对雌虫生殖行为的影响。主要结果如下： １．描述了桑天牛生殖系统解剖构造，测定了桑天牛血淋巴、生殖系统内容物成分及ｐＨ，研究了交配活动对血淋巴、生殖器官内蛋白质和可溶性总糖含量的影响。 ２．ＭＡＧ、精巢、卵巢可以利用甲硫氨酸（Ｍｅｔ）合成ＪＨ，而雌、雄成虫的ＣＡ均无合成能力。放射化学法离体培养发现雄性附腺（ＭＡＧ）和精巢合成ＪＨ的最高峰分别出现在培养６ｈ、８ｈ。 ３．高效液相色谱（Ｈｉｇｈ ｐｅｒｆｏｒ眦ｎｃｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，ＨＰＬＣ）检测发现桑天牛成虫ＪＨ生物合成遵循法尼酸（ＦＡ）一甲基法尼酯（肝）一ＪＨ途径。雌、雄成虫的ＣＡ可利用法尼醇（Ｆａｒｎｅｓ０１）合成ＦＡ但不能合成肝、ＪＨⅢ。精巢、ＭＡＧ、卵巢具有利用肝合成ＪＨＩＩＩ的能力。ＣＡ合成的ＦＡ被释放进入血淋巴后，被来自血淋巴的甲基转移酶合成肝，ＭＦ在各生殖器官内形成ＪＨⅢ。 ４．２８℃下暗光孵育３０ｈ的胚胎开始利用３Ｈ—Ｍｅｔ合成ＪＨ，胚胎合成ＪＨ亦遵循ＦＡ—ＭＦ—ＪＨ途径。胚胎时期ＭＦ与ＦＡ为主要的ＪＨ形式。对初孵幼虫与卵壳的分别检测中发现：卵壳上没有ＪＨⅢ，但仍有未被胚胎利用完的ＦＡ和肝存在，初孵幼虫体内的ＦＡ、肝、ＪＨ来源不同。 ５．将掺有３Ｈ—Ｍｅｔ的Ｍｅｄｉｕｍ １９９培养液注入雄虫体内，饲养２４ｈ后与无放射性的雌虫进行交配，发现：交配前、后，雄虫的血淋巴、ｃＡ、生殖系统、ＭＡＧ内均有放射性；交配后ＭＡＧ内的放射性含量明显降低。配对雌虫血淋巴、ＣＡ、卵巢均可以检测到放射性。ＨＰＬＣ检测发现，交配后雄虫血淋巴内的ＪＨⅢ含量无变化，ＭＡＧ内的ＪＨⅢ含量降低了４１．６３％，配对雌虫血淋巴和卵巢内的ＪＨⅢ含量均明显增加。 ６．以１８℃、４℃下ｐＨ ７．０的磷酸缓冲液为工作环境。卵巢离体检测发现，标样ＪＨ和ＭＡＧ内容物均能促进卵巢对卵黄原蛋白（Ｖｉｔｅｌｌｏｇｅｎｉｎ，Ｖｇ）的摄取。将标样ＪＨ和ＭＡＧ内容物注射入桑天牛雌虫体内，发现ＪＨ和ＭＡＧ内容物对雌虫的产卵量、寿命、取食量都具有促进作用，桑天牛的生殖调控为ＪＨ主导型。关键词：桑天牛；保幼激素；生物合成机制；生殖调控ｏｆ Ｖｇ．Ｔｈｅ ｂｅＳｔ ｄｉｓｓ０１Ｖｅｄ ｌｉｑｕｉｄ ｓｙＳｔｅｍ ｗ硒ｃｈｏｓｅＭｅ锄ｗｈｎｅ，Ⅱｌｅ ＪＨ ａｎｄ ＭＡＧ ｓｅｃｒｃｔｉｏＩｌｓ、）ＩｒａＬｓｉＩ巧ｅｃｔｅｄ ｉＩｌｔ０ ｆｅｍａｌｅ，ｂｏｍ ｏｆ ｔ１１ｅｍ ｃａｎ ｉ１１Ｃｒｅａｓｅｄ ｔ：ｈｅ ｆｅｅｄｉＩ唱ａｍｏｕｎｔ，ｆｅｍａｌｅ ｒｅｃ印ｔｉｖｉ劬危ｃｕｎｄｉ哆ｉＩｌ ＶｉＶｏ．Ｋ哪７０ｒｄｓ：却，．ｆＤＭ’伊聊ｌ口一；Ｊｕｖｅｌｌｉｌｅ ｈｏｍｏｎｅ；Ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ｍｅｃｌ测ｓｍ；ＲｅｐｒｏｄｕＣｔｉＶｅｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ Ｔｉ锄Ｌｉｌｌｇ（Ｆｏｒｅｓｔ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ） Ｓｕｐｅｒｖｉｓｅｄ ｂｙ ｐｒｏ￡Ｊｉ Ｂａｏｚｌｌｏｎｇ ３ 骑谢 师风垂范，惠泽终生！．本论文是在导师嵇保中教授的悉心指导下完成的。从论文的选题、开展到成文的写作，无不凝聚着导师的大量心血。导师求实严谨的科研精神，勤奋认真的工作态度，精深渊博的知识修养，使我受益匪浅。在此致以我最诚挚的谢意！ 感谢南京市中山陵园管理局园林处副处长刘曙雯研究员级高级工程师，徐州市森林病虫防治检疫站站长郭同斌研究员级高级工程师对实验开展的帮助与指导！ 感谢南京大学医药生物技术国家重点实验室何执静高级工程师在实验开展中对我的帮助与关心。感谢昆虫生理生化实验室贺春玲、金凤、高洁、张凯、况美华、林晓、武福华、刘平、文平、于秀坤等师弟妹对我的帮助。同时还要感谢我的同学，南京林业大学林木遗传育种专业０５级博士胥猛和南京林业大学水土保持与荒漠化防治专业０５级博士单奇华在实验开展及后期数据处理上的帮助与指教！ 最后感谢我的家人给予我的精神上的支持与生活上的关心。感谢我的父母多年来的养育与培育之恩，感谢我的爱人印八零、妹妹印茹对实验开展的帮助及生活上无微不至的照顾！ 作者：田铃 ２００８年６月 第一章文献综述 第一节桑天牛研究进展 桑天牛又名粒肩天牛、桑褐天牛，为鞘翅目天牛科沟胫天牛亚科粒肩天牛属昆虫，仅亚洲地区有分布。桑天牛是我国重要的钻蛀类害虫，分布在华中、华东、华南、西南、华北及东北的２５个省、市、自